[发明专利]利用超高效液相色谱-质谱联用技术检测麦芽五糖的方法

说明书

本发明公开了一种利用超高效液相色谱‑质谱联用技术检测麦芽五糖的方法，包括以下步骤：（1）取麦芽五糖适量，加水溶解，配置成一定浓度的供试品溶液。（2）进样，按以下色谱条件和质谱条件进行检测；色谱条件为：色谱柱：Waters Xbridge BEH Amide 2.1x100mm；流动相：乙腈‑水梯度洗脱，0～15min保持87％乙腈，15～20min由87％乙腈逐渐下降至15％乙腈，20～30min保持15％乙腈；质谱条件为：ESI源，选择离子监测（SIM）模式，碎裂电压：130v，鞘气流速：12L/min，毛细管电压：4000v，提取精确质量数[M‑H]^‑827.4，运用浓度与峰面积的常用对数进行线性定量。该方法具有定性精准、灵敏度高、精密度高、线性好、操作简便的特点，适合于麦芽五糖的分析检测。

技术领域

本发明涉及一种利用超高效液相色谱-质谱联用技术检测麦芽五糖的方法，属于化学分析及检测领域。

背景技术

麦芽五糖是一种低聚糖，其甜度较低，对肠道内腐败菌有抑制作用，被广泛用于食品、化妆品、医药等领域。蜂蜜为蜜蜂科昆虫中华蜜蜂Apis cerana Fabricius或意大利蜂Apis mellifera Linnaeus所酿的蜜。近年来，在天然蜂蜜中掺入各种低廉的果葡糖浆、麦芽糖浆等掺杂蜂蜜的情况十分严重，以富含淀粉的植物，通过水解制取果葡糖浆等水解糖浆，因水解糖浆类会存在水解不完全的寡糖成分，如麦芽五糖及分子量更高的糖类化合物；而天然蜂蜜中不含有五糖及分子量更高以上的寡糖，因此通过研究麦芽五糖的分析检测方法，可以为蜂蜜的防伪检验提供新的思路。

麦芽五糖，分子式为：C₃₀H₅₂O₂₆，分子量828.7，CAS号为34620-76-3，其结构如图：

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目前常用于糖类分析的方法主要有离子交换色谱法（IEC）、凝胶色谱法（GPC）、高效液相色谱法（HPLC）、高效毛细管电泳法（HPCE）；测定糖类的主要的检测器是紫外检测器、红外检测器、电化学检测器、示差折光检测器和蒸发光散射检测器。由于糖类物质沸点高、难挥发、不易气化等特点，必须经过一次或两次的衍生反应进行检测，这样对实际分析带来误差和不便。吴红京等人通过高效液相色谱-示差折光检测器对麦芽低聚糖的组分进行定性及定量，该方法虽过程简单，但需要用时间窗法和标样加样品重叠法对样品中的六种糖进行定性，且麦芽五糖呈现双峰，线性拟合度差，检测限太高，灵敏度低，给定性和定量带来干扰。因此有必要探索出快速定性且准确定量的检测方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种操作时间短、灵敏度高、重复性好、线性拟合度高的麦芽五糖含量检测方法，同时为糖类化合物分析检测提供新的思路。

为解决上述技术问题，本发明提供的利用超高效液相色谱-质谱联用技术检测麦芽五糖的方法，可以通过下列步骤来实现：

（1）取麦芽五糖适量，加水溶解，配置成一定浓度的供试品溶液；

（2）进样，按以下色谱条件和质谱条件进行检测；

色谱条件为：色谱柱：Waters Xbridge BEH Amide 2.1x100mm；流动相：乙腈-水梯度洗脱，0～15min 保持87％乙腈，15～20min 由87％乙腈逐渐下降至15％乙腈，20～30min保持15％乙腈；流动相中的百分比为体积百分比；

质谱条件为：ESI源，选择离子监测（SIM）模式，碎裂电压（Fragmentor）：130v，鞘气流速（Sheath gas flow）：12L/min，毛细管电压（Caplliary）：4000v，提取精确质量数[M-H]^- 827.4，运用浓度与峰面积的常用对数进行线性定量。