[发明专利]化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法

权利要求书

1.一种化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法，包括以下步骤：

提供接种在体外培养容器中的人食管上皮细胞；

对所述人食管上皮细胞分别施加预定浓度范围内的多个浓度的待检化学物后培养预定时间，测定能够反映所述人食管上皮细胞的细胞活力随所述待检化学物施加浓度的变化的曲线；

选取所述曲线中的预定细胞活力范围对应的所述待检化学物的浓度区间作为致癌测定浓度区间，选取所述致癌测定浓度区间的多个浓度作为致癌测定浓度；以及

对所述人食管上皮细胞分别施加所述致癌测定浓度的所述待检化学物，进行所述待检化学物对所述人食管上皮细胞的致癌实验检测。

2.根据权利要求1所述的化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法，其特征在于，所述人食管上皮细胞在所述培养容器中的接种浓度为8×10⁴/ml～2×10⁵/ml。

3.根据权利要求1所述的化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法，其特征在于，所述预定浓度范围的最低浓度为0～100nmol/L，所述预定浓度范围的最高浓度为10mmol/L～100mmol/L。

4.根据权利要求1所述的化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法，其特征在于，所述预定细胞活力范围内的最低细胞活力为90％～95％。

5.根据权利要求1所述的化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法，其特征在于，所述预定浓度范围内的多个浓度为等比数列。

6.根据权利要求1所述的化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法，其特征在于，所述多个致癌测定浓度为等比数列。

7.根据权利要求1所述的化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法，其特征在于，所述待检化学物对所述人食管上皮细胞的致癌实验检测包括细胞增殖能力检测、细胞迁移和侵袭能力检测以及所述待检化学物诱发动物成瘤实验检测中的一种或多种。

8.根据权利要求1所述的化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法，其特征在于，还包括对所述致癌实验检测中所述待检化学物诱发所述人食管上皮细胞成癌的肿瘤细胞进行基因表达分析，确定表达差异的基因与人体代谢通路的关系。

9.根据权利要求1所述的化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法，其特征在于，还包括检测添加人肝微粒体对所述人食管上皮细胞的体外培养下的细胞活力影响的步骤。

10.根据权利要求1所述的化学物诱发人食管癌的体外检测模型的建立方法，其特征在于，所述人食管上皮细胞的培养条件为5％二氧化碳，培养温度为37℃。