[发明专利]禽流感病毒血凝素抗原及其制备方法、应用和禽流感疫苗在审
申请号: | 201811096574.8 | 申请日: | 2018-09-19 |
公开(公告)号: | CN109134624A | 公开(公告)日: | 2019-01-04 |
发明(设计)人: | 贺笋;李俊辉;潘晓梅;程兰玲;张伟;王遵宝 | 申请(专利权)人: | 天康生物股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/11 | 分类号: | C07K14/11;C12N5/10;C12N15/85;A61K39/145;A61P31/16 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 齐云 |
地址: | 830000 新疆维吾尔自治区*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 禽流感病毒血 抗原 制备 禽流感疫苗 血凝素蛋白 广谱性 哺乳动物表达系统 抗体几何平均滴度 抗原免疫原性 生物技术领域 规模化生产 常规疫苗 抗原测定 免疫禽类 免疫效力 免疫原性 疫苗生产 高滴度 禽流感 抗体 亚型 应用 蛋白 检测 预防 | ||
1.一种禽流感病毒血凝素抗原,其特征在于,所述禽流感病毒血凝素抗原为具有如SEQID NO.1所示序列表达的血凝素蛋白;所述血凝素蛋白为哺乳动物表达系统表达的蛋白。
2.根据权利要求1所述的禽流感病毒血凝素抗原,其特征在于,所述哺乳动物表达系统中,以HEK 293-F细胞作为宿主细胞。
3.一种权利要求1或2所述的禽流感病毒血凝素抗原的制备方法,其特征在于,包括:在哺乳动物表达系统中,表达所述禽流感病毒血凝素抗原的基因。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,在HEK 293-F细胞表达系统中表达所述禽流感病毒血凝素抗原的基因。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,提供包含表达所述禽流感病毒血凝素抗原的基因的表达载体,将所述表达载体导入宿主细胞中,然后对宿主细胞进行加压筛选,使宿主细胞表达所述禽流感病毒血凝素抗原;
优选地,对加压筛选后的宿主细胞进行单克隆筛选。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,使用遗传霉素筛选系统筛选表达所述禽流感病毒血凝素抗原的宿主细胞;
优选地,所述遗传霉素筛选系统中使用的表达载体为pcDNA3.1、pEE6.4、pEE12.4或pGL4.13。
7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述宿主细胞表达所述禽流感病毒血凝素抗原的表达量不低于1mg/ml。
8.权利要求1或2所述的禽流感病毒血凝素抗原,或权利要求3-7中任一项所述的禽流感病毒血凝素抗原的制备方法制备得到的禽流感病毒血凝素抗原的应用,其特征在于,包括如下(a)-(d)中的至少一种:
(a)制备禽流感病毒疫苗;
(b)制备禽流感病毒的抗体;
(c)制备检测禽流感病毒抗体的试剂盒;
(d)制备禽流感病毒诊断抗原。
9.一种包含权利要求1或2所述的禽流感病毒血凝素抗原的禽流感疫苗。
10.根据权利要求9所述的禽流感疫苗,其特征在于,所述禽流感疫苗中禽流感病毒血凝素抗原的用量为1-3μg/羽份;
优选地,所述疫苗还包括辅料,所述辅料包括疫苗佐剂、稳定剂和抗生素中的一种或多种;
优选地,所述疫苗佐剂包括氢氧化铝胶、弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂、白油佐剂、卡波姆、蜂胶、MF59佐剂或ISA201,优选使用ISA201。
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