[发明专利]一种用于鉴别中国人参的DNA杂交方法有效
申请号: | 201811099711.3 | 申请日: | 2018-09-20 |
公开(公告)号: | CN109112185B | 公开(公告)日: | 2022-05-27 |
发明(设计)人: | 李志恒;奥伯克·克里斯托弗 | 申请(专利权)人: | 珠海澳加动力生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6837 | 分类号: | C12Q1/6837;C12Q1/6827 |
代理公司: | 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 | 代理人: | 隋金艳 |
地址: | 519000 广东省珠海市横琴新区环岛北路252*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 鉴别 中国 人参 dna 杂交 方法 | ||
1.一种用于鉴别中国人参的DNA杂交方法,其特征在于操作步骤包括:将序列为SEQ IDNO:2探针固定到微流控芯片中,洗涤微流控芯片后, 将生物素标记的单链待测样本DNA加入到微流控芯片中,除去微流道芯片中的溶液,用金纳米颗粒溶液洗涤微流道芯片。
2.如权利要求1所述的用于鉴别中国人参的DNA杂交方法,其特征在于所述金纳米颗粒溶液中金纳米颗粒的浓度为10nM。
3.如权利要求1所述的用于鉴别中国人参的DNA杂交方法,其特征在于所述方法为基于微流控芯片的方法,所述微流控芯片包括测试板和流道板,所述流道板表面刻有一条以上、互不交叉的微流道;调整所述流道板与所述测试板的叠放位置,在所述测试板表面形成相互交叉的探针固定轨迹和待测样本DNA流动轨迹,所述探针固定轨迹和待测样本DNA流动轨迹交叉处为反应区。
4.如权利要求3所述的用于鉴别中国人参的DNA杂交方法,其特征在于所述流道板的数量为不少于1块。
5.如权利要求3所述的用于鉴别中国人参的DNA杂交方法,其特征在于所述方法其操作步骤包括:
(1)将序列为SEQ ID NO:2的探针加入到微流控芯片中,沿探针固定轨迹被固定到所述测试板表面;
(2)洗涤微流控芯片后,移除流道板,分别洗涤和吹干流道板和测试板,重新叠放流道板和测试板;
(3)将生物素标记的单链待测样本DNA加入到微流控芯片中,待测样本DNA沿待测样本DNA流动轨迹流动,在反应区与固定的探针杂交;
(4)除去微流道芯片中的溶液,用金纳米颗粒浓度为10nM的溶液洗涤微流道芯片,在微流道芯片中加入Cy-5标记的链霉亲和素溶液;
(5)洗涤和干燥微流道芯片,取测试板用激光扫描仪扫描荧光信号。
6.一种鉴别中国人参的DNA杂交方法试剂盒,其特征在于所述试剂盒包括微流控芯片、Cy-5标记的链霉亲和素溶液、洗涤溶液、溶解液、探针;所述微流控芯片包括测试板和流道板,所述流道板表面刻有一条以上、互不交叉的微流道;调整所述流道板与所述测试板的叠放位置,在所述测试板表面形成相互交叉的探针固定轨迹和待测样本DNA流动轨迹,所述探针固定轨迹和待测样本DNA流动轨迹交叉处为反应区;所述探针序列为SEQ ID NO:2,所述的溶解液用于溶解和稀释所述探针和待测样本DNA。
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