[发明专利]一种用于鉴别中国人参的DNA杂交方法

说明书

本发明提供的鉴别中国人参的DNA杂交方法中使用的探针是基于人参属基因组中达玛烯二醇合酶(dammarenediol synthase)基因的单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位点设计。本发明人实验中发现中国人参、西洋参和三七的达玛烯二醇合酶基因相似性高，为了更加准确的鉴别中国人参，发明人设计了多种探针序列，最后筛选出了可以准确鉴别中国人参的探针序列。

技术领域

本发明涉及一种用于鉴别中国人参的DNA杂交方法。

背景技术

中药材人参在分类学上,属于Plantae(植物界)，Apiales(伞形目)，Araliaceae(五加科)，Aralioideae(人参亚科)，Panax(人参属)。人参属下有三个主要的种分类：Panax Ginseng(亚洲参/中国人参)，Panax notoginseng(三七)和Panax Quinquefolius(西洋参)。

虽然中国人参、三七和西洋参起源于同一属，但三种中药材的用途和性质有不同。如 中国人参并不会影响华法林(Warfarin)药物的效果，但是西洋参可以显著影响华法林的 抗凝血活性性质。另外非人工养殖的、自然生长的中国人参价格也比三七和西洋参要高得 多。

由于中国人参、三七和西洋参功效各异、价值相差大，对中国人参快速鉴别的技术和 手段对于保护消费者权益显得十分重要。然而中国人参、三七和西洋参三种中药材在外观 形态学和化学指纹图谱上都极度相似，鉴别中国人参至今仍然是一个十分大的挑战。

基于人参属基因组达玛烯二醇合酶(dammarenediol synthase)基因的单核苷酸多态 性建立的DNA条形码技术，为准确鉴别中国人参提供了一种新方法。但是现在用于鉴别中 国人参的DNA条形码技术，步骤都会包括形成PCR产物和序列鉴别2步，并且都涉及凝胶 电泳分离(gel electrophoretic separation)，过程涉及电场作用及特殊染色，需要花费 大量时间和操作技术上的成本，快速鉴别中国人参的需求任然无法满足，因此需要提供一 种快速鉴别中国人参的技术。

微流控芯片，是一种操控流体在微小通道中流动的系统，能够大幅减少样品消耗，减 少样品处理时间，提高检测分辨率/灵敏度，在疾病诊断、药物筛选、环境检测、食品安全等领域中有广阔的使用前景。

发明内容

本发明提供一种用于鉴别中国人参的DNA杂交方法。

一种用于鉴别中国人参的DNA杂交方法，所述方法的探针序列为SEQ ID NO：2。

所述用于鉴别中国人参的DNA杂交方法中使用的洗涤液为金纳米颗粒溶液。

所述金纳米颗粒溶液中金纳米颗粒的粒径为5nm，金纳米颗粒的浓度为5-20nM。

所述金纳米颗粒溶液中金纳米颗粒的浓度为5nM。

所述金纳米颗粒溶液中起稳定作用的DNA浓度为8nM。

所述用于鉴别中国人参的DNA杂交方法，为基于微流控芯片的方法，所述微流控芯片 包括测试板和流道板，所述流道板表面刻有一条以上、互不交叉的的微流道；调整所述流 道板与所述测试板的叠放位置，在所述测试板表面形成相互交叉的探针固定轨迹和待测样 本DNA流动轨迹，所述探针固定轨迹和待测样本DNA流动轨迹交叉处为反应区。

所述通道板的数量为不少于1块。

所述用于鉴别中国人参的DNA杂交方法，其操作步骤包括：

(1)探针加入到微流控芯片中，沿探针固定轨迹被固定到所述测试板表面；

(2)洗涤微流控芯片后，移除流道板，分别洗涤和吹干流道板和测试板，重新叠放流 道板和测试板；