[发明专利]一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法

权利要求书

1.一种从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）粉碎、提取：将甜茶叶粉碎，过筛，加水，进行连续逆流提取，过滤，得提取液；

（2）酶解、絮凝：在步骤（1）所得提取液中加入酶制剂，进行酶解，酶解液灭活，冷却，絮凝，过滤，水洗滤渣至无甜味，得絮凝液；

（3）超滤、纳滤：将步骤（2）所得絮凝液进行超滤，纳滤，得纳滤截留液；

（4）大孔吸附树脂吸附：将步骤（3）所得纳滤截留液上大孔吸附树脂层析柱吸附，水洗至无甜味，水洗液弃掉，再用有机溶剂梯度洗脱，减压浓缩，得浓缩液；

（5）氧化铝精制：将步骤（4）所得浓缩液上氧化铝层析柱吸附，收集流出液，水洗至无甜味，收集水洗液，流出液和水洗液减压浓缩，得浓缩液；

（6）脱涩、脱苦：在步骤（5）所得浓缩液中，加入活性炭，搅拌，过滤，减压浓缩，喷雾干燥，得甜茶苷粗品；

（7）结晶：将步骤（6）所得甜茶苷粗品用有机溶剂溶解，过滤，结晶，抽滤，真空干燥，粉碎，得甜茶苷产品。

2.根据权利要求1所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述过筛的目数为10～50目；所述水的总用量为甜茶叶质量的5～30倍；所述连续逆流提取的温度为80～100℃，每次提取的时间为1～4h，提取的次数≥1次；用100～300目滤布过滤。

3.根据权利要求1或2所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述酶制剂的添加量为提取液质量的0.01～0.5%；所述酶制剂为纤维素酶制剂、半纤维素酶制剂、果胶酶制剂或蛋白酶制剂中的一种或几种；所述酶解的温度为40～60℃，pH值为2.0～9.0，时间为1～2h；所述灭活的温度为90～120℃，时间为30～60s，压力为常压。

4.根据权利要求1～3之一所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述絮凝是：将絮凝剂加入酶解液中进行絮凝，加入的过程中不断搅拌，至pH值为2～6，再搅拌0.5～1.5h，静置0.5～1.5h，然后调节pH值≥8，再搅拌0.5～1.5h，静置1～4h；所述絮凝剂为FeCl3、FeSO4或AlCl3中的一种或几种；用饱和石灰水调节pH值≥8；所述过滤方式为板框压滤，滤膜孔径为0.4～30μm；水洗滤渣的用水量为甜茶叶原料质量的1～2倍。

5.根据权利要求1～4之一所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（3）中，用于超滤的超滤膜为陶瓷膜，孔径为0.3～1.0μm；所述纳滤是将超滤液先通过截留分子量为800～5000道尔顿的纳滤膜，水赶膜至透过液无甜味，透过液再通过截留分子量为100～500道尔顿的纳滤膜，水赶膜至截留液的百利度≥20%为止，得纳滤截留液。

6.根据权利要求1～5之一所述从甜茶叶中提取甜茶苷的方法，其特征在于：步骤（4）中，所述大孔吸附树脂层析柱由≥2根层析柱组成，纳滤截留液先上第1根层析柱，待其流出液有甜味后，流出液上串接的第2根层析柱，同时纳滤截留液开始上第2根层析柱，以此类推，上柱完成后，将第1根至最末1根层析柱串接起来进行水洗，水洗液弃掉，再用有机溶剂分别对每根层析柱进行梯度洗脱；所述大孔吸附树脂层析柱的径高比为1:2～8；所述大孔吸附树脂与甜茶叶原料的体积质量比为1:5～10；所述上柱的流速为1～4BV/h；所述大孔吸附树脂的型号为D-101、AB-8、LX-T28、DM-130或X-5中的一种或几种；所述水洗的流速为1.0～3.0BV/h；所述有机溶剂梯度洗脱的流速为0.5～2.0BV/h；所述梯度洗脱是指：先用1～3BV体积分数10～30%的有机溶剂洗脱，弃掉洗脱液，再用1～3BV体积分数60～95%的有机溶剂洗脱，收集洗脱液；所述有机溶剂为食用乙醇溶液；所述减压浓缩的温度为60～90℃，压力为-0.09～-0.07MPa，减压浓缩至固含量为10～30%。