[发明专利]一种朱顶红脱毒组织培养和快速繁殖方法

说明书

本发明涉及植物诱导再生脱毒生物技术领域，具体而言，涉及一种朱顶红脱毒组织培养和快速繁殖方法。经高温脱毒、消毒后，取鳞茎片后培养至产生原球茎，再经多代培养以连续脱毒；所述高温脱毒的方法包括：先逐渐升温到40±0.5℃下，再长时间保持在38±0.5℃；以从所述原球茎剥离出来的小原球茎作为外植体进行第一代培养，以后的每一代以上一代培养出的小苗或小原球茎为外植体进行培养；所述第一代培养的外植体为3～8mm的小原球茎；所述第二代培养的外植体为1～3mm的小原球茎；其中，所述取鳞茎片后培养和所述多代培养的每一代培养基中均包含5～60mg/L病毒唑。针对朱顶红的脱毒有良好的效果，可有效防治朱顶红花叶病毒。

技术领域

本发明涉及植物诱导再生脱毒生物技术领域，具体而言，涉及一种朱顶红脱毒组织培养和快速繁殖方法。

背景技术

朱顶红(Hippeartrm hrbridum Hoprt)又名朱顶兰、孤挺花、华胄兰、百子莲，为多年生草本植物，分布在大部分大陆，原产地热带美洲，具有很高的观赏价值和商业价值。朱顶红花叶病毒(Hippearrstrum mosai cvirus Himv)属马铃薯病毒和属黄瓜病毒黄瓜花叶病(Culuber mosai cvirus cmv)。朱顶红受朱顶红病毒的入侵导致朱顶红花叶斑、畸形、严重影响品质，目前尚没有确切的药能有效防治。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种朱顶红脱毒组织培养方法，所述的培养方法针对朱顶红的脱毒和生长具有良好的效果，可有效防治朱顶红花叶病毒。

本发明的第二目的在于提供一种朱顶红的快速繁殖方法，该方法具有植株成活率高、操作简单等优点。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种朱顶红脱毒组织培养方法，经高温脱毒、消毒后，取鳞茎片后培养至产生原球茎，再经多代培养以连续脱毒；

所述高温脱毒的方法包括：先逐渐升温到40±0.5℃下，再长时间保持在38±0.5℃；

以从所述原球茎剥离出来的小原球茎作为外植体进行第一代培养，以后的每一代以上一代培养出的小苗或小原球茎为外植体进行培养；

所述第一代培养的外植体为3～8mm的小原球茎；

所述第二代培养的外植体为1～3mm的小原球茎；

其中，所述取鳞茎片后培养和所述多代培养的每一代培养基中均包含5～60mg/L病毒唑。

一种朱顶红的快速繁殖方法，按上述的脱毒组织培养方法得到组培苗，经病毒检测后，将无毒苗进行驯化移栽

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明为单独针对朱顶红花叶病毒脱毒而设计的朱顶红脱毒组织培养和快速繁殖方法，结合了多重脱毒原理发明；

(2)针对朱顶红病毒在连续高温下钝化的原理，给出精准的温度，可以使朱顶红在节点时间进去进入休眠状态，从而使朱顶红叶芽分化更有活力，能激发朱顶红自身的免疫能力起到自然免疫的成效；

(3)针对朱顶红病毒不能进入茎尖组织的原理，给出了精准的取材大小，有效提高了朱顶红茎尖的生存，提高了成活率；

(4)针对朱顶红病毒繁殖速度低于朱顶红生长速度，给出精准的时间连续取健康球茎脱毒，避免了组织脱分化引起的朱顶红基因变异；

(5)针对病毒唑能抑制病毒DNA和RNA聚合酶从而抑制病毒繁殖的原理，给出精准的药量，不对朱顶红生存产生影响，使朱顶红病株在药的治疗下最终摆脱病毒。

具体实施方式