[发明专利]胰岛细胞抗体检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种胰岛细胞抗体检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：校准品、链霉亲和素磁颗粒悬浮液、化学发光标记物标记的抗人IgG抗体和偶联标记的胰岛细胞抗原。

2.根据权利要求1所述的一种胰岛细胞抗体检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中，链霉亲和素磁颗粒的质量分数是0.007％～0.1％。

3.根据权利要求1所述的一种胰岛细胞抗体检测试剂盒，其特征在于，所述的链霉亲和素磁颗粒悬浮液中，链霉亲和素磁颗粒的粒径为0.05～1μm。

4.根据权利要求1所述的一种胰岛细胞抗体检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物标记的抗人IgG中，抗人IgG为鼠抗人IgG或羊抗人IgG。

5.根据权利要求1所述的一种胰岛细胞抗体检测试剂盒，其特征在于，所述的化学发光标记物标记的抗人IgG中，抗人IgG抗体与化学发光标记物的摩尔比为1:3～20。

6.根据权利要求1、4、5所述的一种胰岛细胞抗体检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为吖啶酯和三联吡啶钌。

7.根据权利要求1所述的一种胰岛细胞抗体检测试剂盒，其特征在于，所述偶联标记的胰岛细胞抗原中，胰岛细胞抗原与偶联标记物的摩尔比为1:5～20。

8.根据权利要求1或7所述的一种胰岛细胞抗体检测试剂盒，其特征在于，所述偶联标记物为生物素。

9.根据权利要求1所述的一种胰岛细胞抗体检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括化学发光预激发液A、化学发光激发液B及清洗液，所述化学发光激发液A为硝酸溶液，化学发光激发液B为氢氧化钠溶液；清洗液为PB。

10.根据权利要求1所述的一种胰岛细胞抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括：

步骤一：链霉亲和素磁颗粒悬浮液的制备

将链霉亲和素磁颗粒溶液和TBST溶液混匀后，放置在磁分离器上，直至上清液无混浊，弃上清，留取磁颗粒，清洗后在缓冲液中配成固相试剂，得到链霉亲和素磁颗粒悬浮液；

步骤二：化学发光标记物标记的抗人IgG抗体的制备

将抗人IgG放入离心管中离心，然后加入碳酸缓冲液，混匀后加入化学发光标记物溶液离心，将离心管密封后放入避光暗盒中，然后将暗盒放入气浴恒温振荡器中混匀，加入封闭液，放入气浴恒温振荡器中混匀，将封闭好的抗体经过纯化、收集，然后放入缓冲液中稀释，保存；

步骤三：偶联标记的胰岛细胞抗原的制备

取胰岛细胞抗原，pH6.5的TRIS缓冲液透析纯化后加入已活化的长链磺化生物素，2～8℃反应1～3h，再转入室温继续反应10～30min，最后加入赖氨酸反应10～30min，经纯化，加入等体积甘油和NaN₃或ProClin300，得到偶联标记的胰岛细胞抗原。