[发明专利]枫香拟茎点霉菌及其应用

权利要求书

1.枫香拟茎点霉菌NUSTb1，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2018476。

2.权利要求1所述枫香拟茎点霉菌NUSTb1，其ITS基因序列如SEQ ID NO：1所示。

3.权利要求1或2所述枫香拟茎点霉菌NUSTb1在制备水溶性胞外多糖中的应用，所述水溶性胞外多糖结构式为：

[ →4）-α-Glc-(1 → 6)- α-Glc-(1 → 4)-α-Glc-(1 → 4) )- α-Glc-(1→ ]n。

4.一种利用权利要求1或2所述枫香拟茎点霉菌NUSTb1制备水溶性胞外多糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）活化：将菌株NUSTb1在固体PDA培养基上活化；

（2）发酵：刮取步骤（1）活化后长在固体PDA培养基上的菌体，接种至pH6.3-6.4液体发酵培养基中，28-30℃，180-200rpm，培养10-15天；

（3）多糖的分离和纯化：将步骤（2）得到的发酵液离心，收集上清液并添加沉淀剂，常温静置过夜后离心取沉淀干燥至无水，然后用去离子水配成1%溶液，离心，上清液中加入sevage溶液，剧烈震荡半小时，静置至完全分层，去掉下层有机相和中间蛋白层，再加入sevage溶液，重复上述步骤，直至中间无蛋白层，得到去蛋白的多糖液：45-55℃旋蒸浓缩，然后采用7-14KDa的透析袋用去离子水透析1-2d，每4-8h换水一次，透析液冻干得粗多糖；粗多糖再经葡聚糖凝胶柱分离纯化得到纯多糖。

5.根据权利要求4所述的制备水溶性胞外多糖的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述固体PDA培养基为：马铃薯浸粉5g/L，葡萄糖20g/L，琼脂14g/L，PH5.4-5.8，水1L，121℃15分钟灭菌所得。

6.根据权利要求4所述的制备水溶性胞外多糖的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述液体发酵培养基包括以下重量份数的各个组分：甘露醇20g，麦芽糖20g，谷氨酰胺10g，磷酸二氢钾0.5g，葡萄糖10g，硫酸镁0.3g，色氨酸0.5g，酵母浸膏3g，水1L；混合均匀后115℃灭菌15min，冷却得到液体发酵培养基。

7.根据权利要求4所述的制备水溶性胞外多糖的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述沉淀剂为工业95%乙醇或甲醇或丙酮。

8.根据权利要求4所述的制备水溶性胞外多糖的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述离心取沉淀干燥是指在60℃下烘干或者冷冻干燥；所述sevage溶液加入量为上清液体积的三分之一或四分之一。