[发明专利]食管鳞状细胞癌微环境细胞标志物分子模型及其应用

权利要求书

1.抗CD117蛋白抗体、抗CD163蛋白抗体和抗a-SMA蛋白抗体在制备预测食管鳞癌患者预后的试剂盒中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，试剂盒还包括山羊血清，0.01M柠檬酸盐修复液，3％H₂O₂，Polymer增强剂，Polymer聚合物，DAB显色试剂与PBS溶液。

3.抗CD117蛋白抗体、抗CD163蛋白抗体和抗a-SMA蛋白抗体在制备联合预测食管鳞癌患者预后及对辅助治疗敏感性群体分组试剂盒中的应用。

4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所检测的标本为中性福尔马林固定和石蜡包埋的组织蜡块。

5.根据权利要求3所述应用，其特征在于，使用的检测方法为免疫组织化学超敏型二步法，具体步骤如下：对中性福尔马林固定和石蜡包埋的组织蜡块进行切片，切片经脱蜡至水化、抗原修复、灭活内源性过氧化物酶和山羊血清封闭后，分别与抗CD117蛋白抗体、抗CD163蛋白抗体和抗a-SMA蛋白抗体在保湿盒内4℃孵育过夜；随后分别与Polymer增强剂和Polymer聚合物孵育后，DAB显色和苏木素复染细胞核；最后经酒精脱水和二甲苯透明后用中性树胶封片，并对每张染色切片进行评分。

6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述抗CD117蛋白抗体标记食管鳞癌固有层及侵袭前沿的肥大细胞，所述抗CD163蛋白抗体标记M2型巨噬细胞，所述抗a-SMA蛋白抗体标记肿瘤相关性成纤维细胞，利用Vectra多光谱切片自动分析系统计算固有层、侵袭前沿的肥大细胞个数，以及肿瘤间质M2型巨噬细胞个数，以及镜下判别侵袭前沿a-SMA阳性肿瘤相关性成纤维细胞表达值；CD117蛋白、CD163蛋白和a-SMA蛋白高低表达的cut-off值由X-tile软件确定。

7.一种食管鳞状细胞癌微环境细胞标志物分子模型，其特征在于，构建分子模型的方程式为：为Y=0.812×A+1.788×B+（-0.931）×C+0.967×D；其中A、B、C、D分别为a-SMA⁺_侵袭前沿成纤维细胞、CD163⁺_间质巨噬细胞、CD117⁺_固有层肥大细胞和CD117⁺_侵袭前沿肥大细胞的表达状态，0代表低表达，1代表高表达；在计算出Y值后，根据X-tile软件把食管鳞癌患者分为高-，中-，低-风险组，即Y值大于2.76的为高风险组，Y值大于等于1.80小于等于2.763为中风险组，Y值小于1.80的为低风险组。

8.根据权利要求7所述食管鳞状细胞癌微环境细胞标志物分子模型的应用，其特征在于，可以用于预测食管鳞癌患者预后及对辅助治疗敏感性群体分组。

9.根据权利要求8所述应用，其特征在于，评价个体食管鳞癌患者预后和辅助治疗敏感性的信息时，只需把该患者3个蛋白的免疫组化结果所对应的表达状态代入公式中，就可以得出Y值，然后与确定的cut-off值比较。