[发明专利]大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因及其免疫防御功能在审
| 申请号： | 201811123807.9 | 申请日： | 2018-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN109486826A | 公开（公告）日： | 2019-03-19 |
| 发明（设计）人： | 刘慧慧;吴炯;迟长凤;黄伟 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C07K14/705;C12N15/10 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 316000 浙江省舟山市普陀海*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 免疫防御功能 大黄鱼 克隆 基因 清道夫受体基因 同源 病原菌 开放阅读框序列 总RNA提取 防御功能 基因免疫 理论基础 理论指导 先天免疫 氨基酸 总RNA 得率 灭活 内源 进化 健康 疾病 养殖 预防 维护 | ||
1. 大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因，其特征在于：所述MARCO基因开放阅读框序列采用同源克隆法与RACE技术克隆获得，所述MARCO基因开放阅读框序列如SEQ ID NO:1所示。
2. 根据权利要求1所述的大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因，其特征在于：所述MARCO基因放阅读框序列全长为1218 bp，编码405个氨基酸。
3.根据权利要求1所述的大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因，其特征在于：所述MARCO基因克隆包括如下步骤：
以提取的总RNA反转录合成的cDNA为模板扩增MARCO基因片段，纯化；
将纯化后的扩增产物进行T-A克隆，测序，即得MARCO基因。
4.根据权利要求2所述的大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因，其特征在于：所述基因扩增用引物为：
MARCO–F：5'-ATGGAGACGTAGGTGGAGGGCACC-3'；
MARCO–R：5'-CTAGGAGCCCTCCAGTGCCGG-3'。
5. 根据权利要求2所述的大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因，其特征在于：所述扩增反应体系为：2.5μL 10×PCR Buffer、0.4μL dNTPs、0.8μL MARCO-F、0.8μL MARCO-R、0.6μLTemplate cDNA、0.4μL Taq DNA polymerase（TaKaRa）、14.5μL RNase free dd H2O。
6. 根据权利要求2所述的大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因，其特征在于：所述扩增条件为：95℃预变性4min；94℃变性30s，55-65℃退火30s，72℃延伸2 min，循环35次；最后72℃延伸10min。
7. 根据权利要求2所述的大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因，其特征在于：所述总RNA提取采用Trizol Regent、磷酸胍和硫脲进行提取。
8. 根据权利要求8所述的大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因，其特征在于：所述TrizolRegent中含有0.03-0.04%磷酸胍和0.01-0.02%硫脲。
9.权利要求1-8任一项所述的大黄鱼清道夫受体基因MARCO基因的用途，其特征在于：所述MARCO基因在大黄鱼免疫防御功能中的用途；所述免疫防御功能包括调节先天免疫维护机体的健康与进化。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江海洋大学，未经浙江海洋大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811123807.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
