[发明专利]茶叶中草铵膦的离子色谱-串联质谱联用检测方法

说明书

本发明公开了一种茶叶中草铵膦的离子色谱‑串联质谱联用检测方法，样品经一级水均质提取、样品提取液以HR‑X固相萃取小柱净化、净化后的样液注入离子色谱系统，使用Dionex IonPac^TMAS19阴离子交换柱色谱柱分离，NaOH溶液洗脱，柱后流出液注入串联四极杆质谱系统，在负离子模式下用多反应监测模式检测其中含有的草铵膦，以保留时间和离子对比例进行定性确证，标准溶液外标法定量。本方法具有样品前处理无需衍生化、简便快速、净化效果好，检测灵敏度高、可同时进行定量和定性确证的特点。

技术领域

本发明属于食品检测技术领域，涉及离子色谱-串联质谱联用法，具体是指一种茶叶中草铵膦的离子色谱-串联质谱联用检测方法。

背景技术

草铵膦是（glufosinate-ammonium）是德国赫斯特公司于上世纪 80年代开发的新型灭杀性除草剂，其产量在世界上仅次于草甘膦和百草枯，位居第三。草铵膦属广谱触杀型除草剂，内吸作用不强，与草甘膦杀根不同，草铵膦先杀叶，通过植物蒸腾作用可以在植物木质部进行传导，其速效性在百草枯和草甘膦之间。百草枯因为毒性问题已在23个国家被禁限用，草甘膦、百草枯在我国经过30多年的长期频繁使用，抗性难除杂草越来越多，导致防效下降，而草铵膦因作用机理独特，对一些难治杂草及对草甘膦和百草枯产生抗性的杂草有较好的防除效果，故近年来使用频率不断上升，特别是在茶园中的运用日益增加，其残留问题越来越受到关注。

欧盟规定茶叶中草铵膦的残留限量为0.1mg/kg，我国食品安全国家标准GB2763-2016规定了茶叶中草铵膦的残留限量为0.5mg/kg，但未指定相应的检测标准。茶叶作为有典型基质效应的经济作物，其草铵膦检测文献报道较少。草铵膦的结构与草甘膦类似，含有膦酸基、 羟基、氨基，为极强的两性化合物，难挥发，紫外光区无吸收。采用气相色谱和气相色谱-质谱法虽然具有较高的灵敏度，但需要衍生化，操作繁琐。已有的植物源产品中（包括茶叶）草铵膦的文献报道以及新颁布的GB23200.108-2018《食品安全国家标准 植物源性食品中草铵膦残留量的测定 液相色谱-质谱联用法》主要采用柱前衍生化-液相色谱串联质谱法测定，通过芴代甲氧基酰氯（FMOC-Cl）在碱性介质中衍生，衍生产物在C₁₈液相柱上保留较好，在质谱仪上灵敏度好，但是过量的衍生试剂进入质谱对仪器部件不利。也有文献报道采用亲水作用的柱子（Hilic柱）分离、液相色谱-质谱联用法直接测定果蔬、咖啡鲜果中的草铵膦残留，但是Hilic柱需采用浓度较高的缓冲盐作流动相，且对草铵膦保留作用也还是不够强，导致草铵膦出峰较早且与样品基质得不到有效分离，基质效应严重。另有文献报道采用离子色谱法测定食品中的草铵膦、草甘膦和氨甲基膦酸，草铵膦等在离子交换柱上保留较好，但离子色谱法仅凭保留时间定性，无法作确证。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的缺点和不足，而提供茶叶中草铵膦的离子色谱-串联四极杆质谱联用检测方法，该方法结合HR-X固相萃取小柱净化、离子色谱-串联质谱联用法，能够对茶叶中草铵膦同时进行定性和定量测定，该方法具有准确、快速、灵敏度高的优点，为草铵膦的快速检测提供了可靠的分析方法。

本发明提供一种茶叶中草铵膦的离子色谱-串联质谱联用检测方法，包括以下步骤，

（一）待测样品的制备：取2.0g茶叶于50mL塑料离心中，加20mL水浸泡30min后用一级水均质提取2min，高速离心后取上层清液获得待净化液；

（二）待净化液的净化：取HR-X固相萃取小柱，加入0.5mL步骤（一）中的待净化液，并弃去流出物，再加入步骤（一）中0.5 mL的待净化液，并收集流出液，经0.22μm尼龙滤膜过滤后获得待测样品溶液；

（三）标准工作溶液的配制：配制草铵膦标准工作溶液，所述草铵膦标准工作溶液的浓度梯度分别为10μg/L,20μg/L,50μg/L,100μg/L,200μg/L,500μg/L；