[发明专利]制备人脂肪干细胞培养液的方法及其在美容用品中的应用

权利要求书

1.一种制备人脂肪干细胞培养液的方法，包括以下步骤：

步骤a.使用0.25vol％胰酶和0.1vol％胶原酶联合消化人源脂肪组织，消化20分钟后，液面分为三层，上层为脂肪细胞层，中层为脂肪组织层，下层为含单个核细胞的液体，取下层液体，采用换液方式冲走溶液中的红细胞，制得脂肪干细胞沉淀液；

步骤b.将所述脂肪干细胞沉淀液加入L-DMEM完全培养基中终止消化并进行脂肪干细胞原代培养；

步骤c.用0.25vol％胰酶和0.04％EDTA对原代脂肪干细胞进行消化传代，传代培养过程中提供O₂分压为1～5％、CO₂分压为5％的低氧气氛以及10～30mJ/cm²的低剂量紫外线照射，并在培养过程中加入1×10^-7mol/L胰岛素，获得脂肪干细胞培养物；

步骤d.将所述脂肪干细胞培养物液离心，过滤，除去脂肪干细胞，得到滤液即为所述脂肪干细胞培养液。

2.如权利要求1所述制备人脂肪干细胞培养液的方法，其特征在于：在所述步骤c中，O₂分压为3％。

3.如权利要求1所述制备人脂肪干细胞培养液的方法，其特征在于：在所述步骤b和所述步骤c的培养过程中加入维生素C、维生素D₃、T肿瘤坏死因子-α或血小板衍生因子中的一种或多种。

4.如权利要求1所述制备人脂肪干细胞培养液的方法，其特征在于：在所述步骤c中，提供20mJ/cm²的低剂量紫外线照射。

5.采用如权利要求1～4任一项所述的方法制备得到的人脂肪干细胞培养液。

6.如权利要求5所述的培养液在护肤美容用品中的应用。

7.一种护肤美容用品，其特征在于：含有如权利要求5所述的人脂肪干细胞培养液。

8.如权利要求7所述的护肤美容用品，其特征在于：所述护肤美容用品包括清洁类产品、美白除皱类产品以及化妆类产品。

9.如权利要求8所述的护肤美容用品，其特征在于：

所述清洁类产品包括洗手液、沐浴产品、洗发护发产品、洁面产品和卸妆产品；

所述美白除皱类产品包括：润肤霜、爽肤水、收缩水、化妆水、乳液、日霜、晚霜、精华液、眼霜、护手霜、防裂膏、精华液；

所述化妆类产品包括：妆前乳、隔离霜、粉底霜、唇膏、胭脂、花露水、香粉和面膜。

10.如权利要求8所述的护肤美容用品，其特征在于，所述护肤美容用品为乳液，除了水分，其含有重量百分比为5～10％的所述脂肪干细胞培养液，且还含有如下重量百分比组分：