[发明专利]使用高效液相色谱法测定利伐沙班及其有关物质的方法

权利要求书

1.一种使用高效液相色谱法测定利伐沙班及其有关物质的方法，其中，

所述高效液相色谱法包括以下步骤：

1)制备利伐沙班及其有关物质的对照品溶液：

A.制备流动相A和流动相B；

B.制备混合溶剂：

将流动相A和流动相B混合，其中流动相A和流动相B的体积比为40-70：60-30；

C.制备利伐沙班对照品溶液：

精密取利伐沙班对照品，置于量瓶中，加入步骤B制备的混合溶剂溶解并定容至刻度，摇匀，作为利伐沙班的对照品溶液；

D.制备有关物质对照品溶液：

分别精密称取各种有关物质，置于量瓶中，加入步骤B制备的混合溶剂溶解并定容至刻度，作为对照品贮备溶液；然后分别取对照品贮备溶液，置于同一100mL量瓶中，加入混合溶剂溶解并定容至刻度，作为有关物质对照品溶液；

2)制备供试品溶液：

精密称取利伐沙班供试品，置于量瓶中，加入步骤1)操作B制备的混合溶剂溶解并定容至刻度，作为供试品溶液；

3)高效液相色谱检测；

其中，所述高效液相色谱检测的条件如下：

色谱柱以十八烷基硅烷键合超纯全多孔球形硅胶为固定相，规格为250mm*4.6mm，5μm；

流动相A为pH 5.0-7.0的磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液或碳酸盐缓冲液；流动相B为乙腈或甲醇；

流速为0.2-2.0mL/min；

双波长检测模式，检测波长为220nm，250nm；

色谱柱柱温为30-45℃；

按以下条件进行梯度洗脱：

所述有关物质如下所示：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述高效液相色谱法的色谱柱为月旭LP。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述高效液相色谱法中，对照品溶液与供试品溶液的取样量分别为5-20μL。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，流动相A为pH为5.0-7.0的磷酸二氢钠-磷酸缓冲液，取1.42g磷酸二氢钠，溶于1000mL水中，用磷酸调节pH，作为流动相A；流动相B为乙腈。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，在对照品溶液与供试品溶液进入高效液相色谱仪的进样器之前，先经过捕集流动相杂质的小柱。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，混合溶剂中流动相A和流动相B的体积比为50:50。