[发明专利]一种快速繁殖水曲柳胚性细胞的方法有效
| 申请号： | 201811130201.8 | 申请日： | 2018-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN110946073B | 公开（公告）日： | 2021-04-16 |
| 发明（设计）人： | 齐凤慧;詹亚光;陈思齐;刘林;曾凡锁 | 申请（专利权）人： | 东北林业大学 |
| 主分类号： | C12N5/02 | 分类号： | C12N5/02;A01H4/00 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 邓宇 |
| 地址： | 150040 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 繁殖 水曲柳 细胞 方法 | ||
1.一种快速繁殖水曲柳胚性细胞的方法，其特征在于，所述方法采用水曲柳愈伤组织，接种于F4培养基中培养，其包括如下步骤：
(1)培养基选择：F4固体培养基，成分为WPM+蔗糖10-80g/L+BA1.5mg/L +NAA0.1mg/L +TDZ0.3mg/L +IBA0.5mg/L +琼脂4.5g/L，pH值5.8-6.0；
F4液体培养基，成分为WPM+蔗糖10-80g/L+ BA1.5mg/L +NAA0.1mg/L +TDZ0.3mg/L +IBA0.5mg/L，pH值5.8-6.0；
（2）将水曲柳愈伤组织接种在步骤（1）中的F4固体培养基中，置于培养室培养，昼夜光照周期培养条件为：白天光照强度为2000-3000Lux，光照时间12-14h/d，温度25
（3）选取步骤（2）中松散的胚性愈伤组织，接种在步骤（1）中的F4液体培养基中，置于摇床上震荡培养，转速为120rpm；昼夜光照周期培养条件为：白天光照强度为2000-3000Lux，光照时间12-14h/d，温度25
（4）在无菌条件下，用细胞筛过滤单细胞和小细胞团，分别放入F4液体养基或F4固体培养基中，即可获得水曲柳单细胞和胚性细胞团。
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