[发明专利]一种具有抗炎活性的大分子量黄芪多糖及其制备方法与应用

说明书

本发明公开一种具有抗炎活性的大分子量黄芪多糖及其制备方法与应用，属于天然药物分离纯化领域。所述大分子量黄芪多糖的分子量为2,000～4,000kDa，纯度为75％以上。本发明还提供一种大分子量黄芪多糖的制备方法与应用，该方法运用水提醇沉法提取纯化得到大分子量的APS，使用的DEAE‑52层析柱结合HW‑65F层析柱分离纯化的方法可得到高纯度的大分子量黄芪多糖，且稳定可行，所得产品纯度较高，此外并将高纯的黄芪精多糖APS 3a作用于由DSS诱导的小鼠肠炎模型中，发现具有较好的抗炎活性，可用于制备抗炎药物。

技术领域

本发明属于天然药物分离纯化领域，具体涉及一种具有抗炎活性的大分子量黄芪多糖及其制备方法与应用。

背景技术

黄芪，来自豆科植物蒙古黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao)或膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.)的干燥根，始载于《神农本草经》，味甘，微温，归脾、肺经，具有补脾益气、利水消肿、托毒生肌等功效，迄今已使用两千多年。黄芪中主要含有黄酮类、皂苷类、多糖类及一些微量元素等。而黄芪多糖(Astragalus polysaccharides，APS)作为黄芪的主要水溶性成分，在诸多活性中发挥重要作用。

APS极性偏大，较多采用水提法进行提取，水提液浓缩后直接醇沉或分级醇沉后可得到分子量不同段的APS。黄芪多糖经水提醇沉后需要进行脱蛋白处理，如酶法、Sevage法、三氯乙酸法都是除蛋白常选用的方法，但是每种单一的方法都有一定局限性，酶法与Sevage法联用可提高多糖纯化的效果。除蛋白后的黄芪多糖经透析、冷冻干燥后即得黄芪粗多糖。黄芪粗多糖依次经不同性质的层析柱填料可以得到纯度较高的黄芪精多糖，通常填料类型有离子交换柱层析，以DEAE-纤维素最常用，而凝胶过滤层析填料种类较丰富，常用有葡萄糖凝胶(Sephadex G)、聚丙烯酰胺葡萄糖凝胶(Sephacryl HR)及琼脂糖凝胶(Sepharose)，但这些填料的分离范围普遍在几千到几十万道尔顿(Da)，不适用于大分子多糖的分离。由于分子量较高部分(分子量在百万级Da)的结构更加复杂，分离纯化更加困难，相应研究甚少，目前APS的研究大多是分子量较低的部分(分子量在几千到几十万Da不等)，而由于分子量较高部分(分子量在百万级)的结构更加复杂，分离纯化更加困难，相应研究甚少，因此，高分子量的APS的提纯与制备及其活性探究是一大难点存在一定的挑战性。

以往的报道多集中在小分子量的黄芪多糖的活性方面，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等方面，而其大分子量的多糖抗炎活性尚无报道。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种具有抗炎活性的大分子量黄芪多糖。

本发明的另一目的在于提供上述具有抗炎活性的大分子量黄芪多糖的制备方法。

本发明的再一目的在于提供上述具有抗炎活性的大分子量黄芪多糖的应用。

本发明提供一种大分子量(2,000～4,000kDa)APS的提取纯化技术，该方法稳定可行，所得产品纯度较高，此外并将高纯的大分子量APS作用于DSS诱导小鼠的肠炎模型中发现具有较好的抗炎活性。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种具有抗炎活性的大分子量黄芪多糖，其分子量为2,000～4,000kDa，纯度为75％以上。

优选的，其分子量为2,700～3,700kDa，纯度为75％以上。

更优选的，其分子量为3,300～3,500kDa，纯度为85％以上。

进一步的，其分子量为3,300～3,500kDa，纯度为88％以上。

最优选的，其分子量为3,388kDa，纯度为88％以上。