[发明专利]抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体、制备方法及用途有效
| 申请号： | 201811131111.0 | 申请日： | 2018-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN109336972B | 公开（公告）日： | 2021-07-20 |
| 发明（设计）人： | 胡适;刘烁吾;傅文燕;雷长海;李天 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C12N15/13;C12N15/63;A61K39/395;A61P39/02 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 赵青 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 海蛇 神经 毒素 sn160 纳米 抗体 制备 方法 用途 | ||
1.一种抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体为VHH抗体，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.编码权利要求1所述的抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体的核酸，其特征在于，所述核酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.权利要求1所述的抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(A)全基因合成抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体VHH片段；
(B)采用PCR技术对步骤(A)中获得的抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体VHH片段进行克隆，PCR产物经琼脂糖凝胶电泳纯化回收并克隆到表达载体中，测序验证后确认获得正确的克隆；
(C)将上述表达载体引入宿主细胞内进行融合蛋白的表达。
4.根据权利要求3所述的抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体的制备方法，其特征在于：
其中，在步骤(B)中，PCR所采用的引物序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
5.根据权利要求3所述的抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体的制备方法，其特征在于：
其中，所述表达载体为pGEM-T、Pet32a，pcDNA3.1、pEE6.4、pEE12.4、pDHFR或pDR1，所述表达载体中包括连接有合适的转录和翻译调节序列的融合DNA序列，
所述宿主细胞为哺乳动物细胞、细菌细胞、昆虫细胞或真菌细胞。
6.含有权利要求1～5任一项所述的抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体的药物组合物，其特征在于，还包括药学上可接受的药物载体。
7.根据权利要求6所述的抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体的药物组合物，其特征在于：
其中，所述药物组合物为水针或冻干制剂，
所述药学上可接受的药物载体包括表面活性剂、溶液稳定剂、等渗调节剂和缓冲液之一或组合。
8.权利要求1～5任一项所述的抗海蛇神经毒素SN160的纳米抗体在制备海蛇抗毒制剂中的用途。
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