[发明专利]携带特异miRNA靶序列的重组寨卡病毒及其应用在审
| 申请号： | 201811140652.X | 申请日： | 2018-09-28 |
| 公开（公告）号： | CN110964701A | 公开（公告）日： | 2020-04-07 |
| 发明（设计）人： | 秦成峰;李晓峰;解东洋;叶青 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/40;C12N15/85;C12N5/10;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人： | 刘依云;乔雪微 |
| 地址： | 100850*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 携带 特异 mirna 序列 重组 病毒 及其 应用 | ||
1.一种DNA分子，其特征在于，该DNA分子含有串联连接的5’非编码区序列、结构蛋白编码序列、非结构蛋白编码序列、和插入有miRNA靶序列的编码序列的3’非编码区序列，其中，所述5’非编码区序列、结构蛋白编码序列、非结构蛋白编码序列和3’非编码区序列来源于寨卡病毒；所述miRNA靶序列的编码序列能够抑制寨卡病毒的增殖，特别能够抑制寨卡病毒在神经系统中的增殖。
2.根据权利要求1所述的DNA分子，其中，所述miRNA靶序列的编码序列为SEQ ID NO：1-6中的任意一种。
3.根据权利要求1或2所述的DNA分子，其中，所述miRNA靶序列的编码序列的插入位点为3’非编码区序列的前端。
4.根据权利要求1所述的DNA分子，其中，所述DNA分子的序列与SEQ ID NO：13所示的序列具有至少90％以上的同一性。
5.一种重组质粒，其特征在于，该重组质粒含有权利要求1-4中任意一项所述的DNA分子。
6.一种重组寨卡病毒，其特征在于，该重组寨卡病毒的基因组RNA对应的cDNA序列与权利要求1-4中任意一项所述的DNA分子的序列相同。
7.一种构建重组寨卡病毒的方法，其特征在于，该方法包括：在寨卡病毒的基因组RNA的3’非编码区插入miRNA靶序列，使所得重组寨卡病毒在神经系统中的复制能力低于插入miRNA靶序列前的寨卡病毒。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述miRNA的靶序列如SEQ ID NO：7-12中的任意一种所示；
和/或，所述miRNA的插入位点为3’非编码区序列的前端；
和/或，所述寨卡病毒的基因组RNA的序列如GenBank编号KU955593所示。
9.根据权利要求7所述的方法，其中，该方法包括将权利要求1-4中任意一项所述的DNA分子或权利要求5中所述的重组质粒进行体外转录，将得到的转录体RNA转染敏感细胞；
优选地，所述敏感细胞为BHK-21细胞、Vero细胞和C6/36细胞中的至少一种。
10.权利要求1-4中任意一项所述的DNA分子、权利要求5所述的重组质粒和权利要求6所述的重组寨卡病毒中的至少一种在制备用于预防寨卡病毒感染的疫苗中的用途。
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