[发明专利]一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法

权利要求书

1.一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

对秦巴硒菇粗多糖进行脱色处理，得到脱色后秦巴硒菇粗多糖；

采用柱层析技术对所述脱色后秦巴硒菇粗多糖进行一次分离提纯，获得一次提纯物；

采用柱层析技术对所述一次提纯物进行二次分离提纯，获得二次提纯物；

所述二次提纯物经过浓缩、透析及冷冻干燥后得到淡黄色粉状物质，即秦巴硒菇多糖蛋白复合物。

2.如权利要求1所述的一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述脱色处理的具体过程包括：

(1)将秦巴硒菇粗多糖溶解于蒸馏水中，形成秦巴硒菇粗多糖溶液；

(2)用氨水调整所述秦巴硒菇粗多糖溶液的pH为8-9；

(3)向所述秦巴硒菇粗多糖溶液中加入30％过氧化氢，在50℃水浴4h，停止加热；

(4)冷却至室温后离心，取上清液；

(5)所述上清液浓缩后经干燥，得到所述脱色后秦巴硒菇粗多糖。

3.如权利要求1所述的一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述一次分离提纯的具体过程包括：

将所述脱色后秦巴硒菇粗多糖与蒸馏水配制成脱色后秦巴硒菇粗多糖溶液；

对所述脱色后秦巴硒菇粗多糖溶液进行梯度洗脱，采集各梯度洗脱的样品；

用紫外分光光度计在490nm波长下分别测量所述各梯度洗脱的样品的吸光度值；

收集测量结果在吸光度峰值面积下的样品，作为一次提纯物。

4.如权利要求1所述的一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述二次分离提纯的具体过程包括：

对所述一次提纯物进行梯度洗脱，采集各梯度洗脱的样品；

用紫外分光光度计在490nm波长下分别测量所述各梯度洗脱的样品的吸光度值；

收集测量结果在吸光度峰值面积下的样品，作为二次提纯物。

5.如权利要求1-4任一项所述的一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述一次分离提纯的过程中采用的柱层析技术的填料选用TOYOPEARL DEAE-650M；所述二次分离提纯的过程中采用的柱层析技术的填料选用TOYOPEARL HW-55S。

6.如权利要求3或4所述的一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述梯度洗脱是在蒸馏水、0.1mol/LNaCl溶液、0.3mol/LNaCl溶液、0.5mol/LNaCl溶液、0.7mol/LNaCl溶液及0.9mol/LNaCl溶液中进行洗脱。

7.如权利要求3或4所述的一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法，其特征在于，所述收集测量结果在吸光度峰值面积下的样品的过程包括先收集符合要求的样品，再将样品在旋转蒸发仪中浓缩，最后用透析袋进行透析处理，得到所述一次提纯物或所述二次提纯物。

8.一种秦巴硒菇多糖蛋白复合物，其特征在于，其是由权利要求1-7任一项所述方法分离提纯得到。