[发明专利]一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法

说明书

本发明公开了一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法，涉及菌类深加工技术领域。本发明方法包括以下步骤：对秦巴硒菇粗多糖进行脱色处理，得到脱色后秦巴硒菇粗多糖；采用柱层析技术对所述脱色后秦巴硒菇粗多糖进行一次分离提纯，获得一次提纯物；采用柱层析技术对所述一次提纯物进行二次分离提纯，获得二次提纯物，所述二次提纯物为秦巴硒菇多糖蛋白混合物。本发明方法避免了传统方法破坏多糖结构的缺点，保留了秦巴硒菇蛋白多糖的药用价值和营养。

技术领域

本发明涉及菌类深加工技术领域，尤其涉及一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法。

背景技术

姬松茸是近年来新兴的一种食药兼用菌，因其富含多种活性成分，可作为免疫调节剂、抗癌剂、抗突变剂和抗菌物质的来源而受到广泛关注。姬松茸多糖的抗肿瘤、增强免疫、抗病毒和降血糖等活性已得到学术界的公认，而目前研究的比较多的是姬松茸粗多糖，由于姬松茸经过水煮提取的粗多糖中含有游离的杂蛋白质、色素以及其他一些低分子物质(包括寡糖、一些单糖、盐分等)，其中蛋白质含量较高，在药品开发过程中必须将其有效去除方能保证药品的稳定性并防止出现不良反应。因此，粗多糖的纯化分离的研究是必不可少的，目前国内外己有不少文献报道了姬松茸多糖的提取、纯化和一些组分研究，但是提取手段相对单一，有的甚至用酸、碱进行提取，可能会破坏多糖结构，进而影响功效，另外提取得率也不够高，报道的平均提取得率只有12.2％左右。

富硒姬松茸(又称为秦巴硒菇)，其富含的硒对动物体生理、生命作用有特殊功能，国内外学者研究发现缺硒可引发多种疾病，硒具有抗氧化、增强机体免疫力、促进新陈代谢、减轻放化疗的毒副作用、保护心脑血管系统、保护胰腺、改善糖尿病代谢功能、抗铅、汞、镉、钽重金属的毒性等功效。

硒是人和动物体内必需的微量元素,体内不能自行合成,必须由外界供给才能满足正常代谢需要。硒分为无机硒和有机硒，与无机硒相比，有机硒因具有更高的生物活性和更低的毒性而易被生物体吸收利用，而有机硒包括硒多糖、硒蛋白、硒核酸等。秦巴硒菇是一种药食两用型菌类，具有很高的营养价值和药用价值，其中含丰富的有机硒。硒多糖作为一种安全有效的免疫反应调节剂，具有毒性小，生物利用率高,药理作用明确等特点，已经用于食品添加剂和作为临床药物用于恢复期肿瘤病人或在化疗时辅助应用。多糖广泛存在于中草药中,资源极其丰富。许多中药多糖本身就是广谱的非特异性免疫促进剂,并且对人体正常细胞无不良效应。而硒与多糖的结合，优化了各自的功效，使其在抗肿瘤、免疫调节等作用方面效果更加显著。秦巴硒菇多糖相比于普通的姬松茸多糖，有着更显著的抗肿瘤、免疫调节等作用。传统提取工艺中，大部分的文献报道的是姬松茸多糖的提取工艺，经过了脱色、脱蛋白的过程，该工艺过程不仅具有上述缺陷，也并不适合提取秦巴硒菇。因此，为了适应市场需求，提高秦巴硒菇药用和营养价值，亟需研究一种针对秦巴硒菇粗多糖的分离纯化工艺。

发明内容

有鉴于此，本发明实施例提供了一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法，主要目的是通过优化的分离提纯工艺提取秦巴硒菇多糖蛋白复合物。

为达到上述目的，本发明主要提供了如下技术方案：

一方面，本发明实施例提供了一种秦巴硒菇多糖的分离纯化方法，包括以下步骤：

对秦巴硒菇粗多糖进行脱色处理，得到脱色后秦巴硒菇粗多糖；

采用柱层析技术对所述脱色后秦巴硒菇粗多糖进行一次分离提纯，获得一次提纯物；

采用柱层析技术对所述一次提纯物进行二次分离提纯，获得二次提纯物；

所述二次提纯物经过浓缩、透析及冷冻干燥后得到淡黄色粉状物质，即秦巴硒菇多糖蛋白复合物。

本发明的上述提取工艺中，采用层析柱技术进行纯化分离，不会破坏提取物的结构；提取过程中采用NaCl溶液洗脱，二次纯化过程中不能完全除去NaCl，透析可以除去NaCl等小分子物质，得到纯度更高的提纯物；采用冷冻干燥技术，不破坏提取物活性。