[发明专利]一种全自动磁珠法DNA提取平台及操作方法在审
申请号: | 201811143838.0 | 申请日: | 2018-09-29 |
公开(公告)号: | CN109055365A | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 柏锦程;张振 | 申请(专利权)人: | 江苏齐耀生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 任立 |
地址: | 212400 江苏省镇江市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 枪头 磁珠法 控制器 存放区 孔板 移液 自动化 交叉污染 离心模块 自动加样 磁分离 试管 移板 加热 耗时 样本 震荡 节约 保证 | ||
1.一种全自动磁珠法DNA提取平台,其特征在于:包括:移液模块(1)、移板模块(2)、加热震荡模块(3)、离心模块(4)、磁分离模块(5)、孔板(6)、试管(7)、枪头存放区(8)、原料存放区(9)、控制器(10),所述离心模块(4)采用独立离心机,最大离心力1000g;所述孔板(6)位于移板模块(2)的操作范围内,上有48个孔洞,用于放置试管(7),最多可放置48根试管(7);所述试管(7)放置与孔板(6)中;所述枪头存放区(8)位于移液模块(1)的操作范围内,存放有提取DNA过程中所要用到的枪头;所示原料存放区(9)位于移液模块(1)的操作范围内,存放有提取DNA所需的材料,包括:消化缓冲液、蛋白酶K、DTT、结合液、羟基磁珠、漂洗液和洗脱液七种;所述控制器(10)利用软件控制系统控制所述的各模块(1-5),保证各个模块(1-5)的有序进行。
2.根据权利要求1所述的一种全自动磁珠法DNA提取平台,其特征在于:所述移液模块(1)采用高精度移液系统,移液精度CV值<5%,与控制器(10)相连,受控制器(10)的控制运行。
3.根据权利要求1所述的一种全自动磁珠法DNA提取平台,其特征在于:所述移板模块(2)采用高精度机械臂,三维轴向定位精度±0.2mm,与控制器(10)相连,受控制器(10)的控制运行。
4.根据权利要求1所述的一种全自动磁珠法DNA提取平台,其特征在于:所述加热震荡模块(3)为加热震荡仪,在进行涡旋震荡的同时可进行加热,与控制器(10)相连,受控制器(10)的控制运行。
5.根据权利要求1所述的一种全自动磁珠法DNA提取平台,其特征在于:所述磁分离模块(5)采用磁棒式分离方式,洗脱体系≥25μl,操作时间不超过40min,与控制器(10)相连,受控制器(10)的控制运行。
6.一种全自动磁珠法DNA提取平台的操作方法,其特征在于:所述操作方法如下:
(一)准备阶段:将枪头放入枪头存放区(8),消化缓冲液、蛋白酶K、DTT、结合液、羟基磁珠、漂洗液和洗脱液放入原料存放区(9),待提取DNA的样本浆液装入试管(7),并将试管(7)放置与孔板(6);
(二)裂解:在控制器(10)的自动控制下,移液模块(1)自枪头存放区(8)取出枪头,使用不同枪头将原材料存放区(9)的消化缓冲液、蛋白酶K、DTT滴入到孔板(6)上的试管(7)中,然后移板模块(2)将孔板(6)带着试管(7)一同移动到加热震荡模块(3),进行消化裂解;
(三)固液分离:裂解完成后,移板模块(2)将孔板(6)移出加热震荡模块(3),移入离心模块(4),进行固液分离,保留上清液;
(四)结合:移板模块(2)将孔板(6)移出离心模块(4),移液模块(1)自枪头存放区(8)取出枪头,使用不同枪头将原材料存放区(9)的结合液和羧基磁珠加入到试管(7)中,使磁珠与DNA结合,结合完成后,移板模块(2)将孔板(6)移至磁分离模块(5),进行磁分离,保留羧基磁珠;
(五)洗涤:磁分离后,移板模块(2)将孔板(6)移出磁分离模块(5),移液模块(1)自枪头存放区(8)取出枪头,使用枪头将原材料存放区(9)的漂洗液加入试管(7)中,进行洗涤,并通过移板模块(2)将孔板(6)移至磁分离模块(5)进行磁分离,保留羧基磁珠,如此洗涤两次;
(六)洗脱:两次洗涤完成后,移板模块(2)将孔板(6)移出磁分离模块(5),移液模块(1)自枪头存放区(8)取出枪头,使用枪头将原材料存放区(9)的洗脱液加入试管(7)中,进行洗脱使得DNA从羧基磁珠上脱附,取上清液即可完成DNA提取。
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