[发明专利]一种全自动磁珠法DNA提取平台及操作方法在审
申请号: | 201811143838.0 | 申请日: | 2018-09-29 |
公开(公告)号: | CN109055365A | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 柏锦程;张振 | 申请(专利权)人: | 江苏齐耀生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 任立 |
地址: | 212400 江苏省镇江市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 枪头 磁珠法 控制器 存放区 孔板 移液 自动化 交叉污染 离心模块 自动加样 磁分离 试管 移板 加热 耗时 样本 震荡 节约 保证 | ||
本发明专利公布了一种全自动磁珠法DNA提取平台及方法,平台包括:移液模块、移板模块、加热震荡模块、离心模块、磁分离模块、孔板、试管、枪头存放区、原料存放区以及控制器。本发明避免了频繁移液,可同时进行48个样本的DNA提取,不同试剂、材料采用专用枪头,枪头可反复使用,既节约了枪头成本,又避免了试剂、材料的交叉污染,通过控制器,实现自动加样、孔板转移、离心及DNA分离,保证了DNA提取全过程的自动化进行,提供一种可进行自动化提取、耗时较少、操作简便、成本更低、精度更高的全自动磁珠法DNA提取平台。
技术领域
本发明涉及DNA提取领域,尤其涉及全自动DNA提取平台。
背景技术
DNA技术在法医物证领域起到越来越重要的作用,DNA提取系统也已经成为当今法医实验室必不可少的实验设施。当前实验室核酸提取系统多采用手工法或者半自动式,繁琐复杂,不但延迟了侦破案件的时间,也影响了案件的侦破效率,越来越成为制约案件侦破的瓶颈,一线工作人员对全自动处理系统的需求越来越急切。
为了确保DNA的有效提取及提取后的DNA能够在相关工作中使用,DNA的提取必须遵守以下原则:1)DNA一级结构必须完整;2)DNA样本中不应含有抑制酶的有机溶剂和过高浓度的金属离子;3)控制其他生物大分子的浓度,避免其污染DNA样本;4)去除DNA以外的核酸。
DNA的提取目前,用于DNA提取的方法主要有:酚抽提法,利用蛋酶和SDS将细胞破碎,细胞内的蛋白被消化,使得DNA暴露出来,在利用酚-氯仿进行抽提,但对蛋白质进行了消化并反复抽提DNA,因此步骤繁琐,且对DNA造成了一定影响,使得提取得到的DNA质量偏低;甲酰胺解聚法,与酚抽提法相似,不同的是在细胞破碎后,先将结合在一起的蛋白质与DNA通过高浓度的甲酰胺进行解聚,再通过透析以获取DNA,该方法获取的DNA质量略高于酚抽提法,且操作较酚抽提法简便,但仍难以满足DNA样本的应用要求,需进一步提高DNA质量;碱变性快速制备法,通过NaOH进行20min的碱环境处理,再进行盐酸中和,离心处理之后取上清液,以此获取DNA,但该方法过于粗糙,无论是碱环境还酸环境都会对DNA造成一定的破坏,因此该方法得到的DNA数量较少且质量比较差,难以用于深入研究应用。
磁珠法DNA提取法与上述几种方法相比,拥有明显的优势:可同时进行多个样品的提取,且能进行自动化提取;操作简单,节约时间;所用到的工具、材料、试剂均无毒无害,操作人员更为安全;提取的DNA纯度高、浓度大,可应用于多领域。
整个国内市场,全自动微量DNA提取系统主要被QIAGEN、Hamilton以及Tecan等国外品牌所占据,其平台成本高,提取速率慢,在实际使用过程中现有的全自动提取平台往往无法应对突发紧急的案件,从而成为实验室的鸡肋。而成本低、效率高的全自动48通道DNA提取工作平台成了大势所趋。
发明内容
本发明的目的是解决DNA片段提取过程中操作步骤繁多、提取速度慢、耗时耗力、提取DNA的精度和纯度较低问题,提供一种可进行自动化提取、耗时较少、操作简便、成本更低、精度更高的全自动磁珠法DNA提取平台即操作方法。
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