[发明专利]痛风性关节炎动物模型的构建方法有效
申请号: | 201811154393.6 | 申请日: | 2018-09-30 |
公开(公告)号: | CN109303784B | 公开(公告)日: | 2020-06-23 |
发明(设计)人: | 李磊;严伟;鞠昌军;邹德宝;姜红江 | 申请(专利权)人: | 山东省文登整骨医院 |
主分类号: | A61K31/522 | 分类号: | A61K31/522;A01K67/027 |
代理公司: | 威海科星专利事务所 37202 | 代理人: | 丁宏斌 |
地址: | 264200 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 痛风 关节炎 动物 模型 构建 方法 | ||
1.一种痛风性关节炎动物模型的构建方法,包括以下步骤:
(1)尿酸盐结晶混悬液的制备;
(2)高尿酸血症基础动物模型的建立;
(3)痛风性关节炎动物模型的建立;
所述步骤(1)中尿酸盐结晶混悬液由以下方法获得:
a.将手术中从痛风病人手足处取得的痛风石,置于温箱内烘干,后将白色结晶置入洁净烧杯中,放入蒸馏水,用玻棒搅拌数分钟,待其基本完全溶解,用漏斗垫上滤纸过滤掉沉渣及杂质,后把溶液置于温箱内烘干,得到尿酸盐结晶;将尿酸盐晶体研磨粉碎后,用孔径250um 的金属网筛过滤,制作成纯化尿酸盐结晶备用;
b.将上述纯化的尿酸盐结晶置于180℃高温灭菌箱3h,然后用体积分数为95%的乙醇洗涤,2000r/min离心15min 3次,室温自然干燥,于超净台上取500mg尿酸盐晶体加9ml生理盐水、1ml吐温80,加热搅拌,配成10ml 50mg/ml尿酸盐溶液;
所述步骤(2)中实验动物选择健康的 30 日龄雄性 SPF鸡,体重500g±50g,适应性喂养 2 周后,开始用高蛋白质高钙饲料饲喂,当SPF 鸡出现痛风的表现后抽取其翅静脉血,分离血清,磷钨酸比色法测血尿酸值,以血尿酸大于 80 mg/ L 的 SPF 鸡作为高尿酸血症基础模型鸡;
所述步骤(3)中实验动物选择步骤(2)中获得高尿酸血症基础模型鸡,麻醉后,消毒左侧膝关节,将 0.5ml 质量浓度为 50mg/ml 的尿酸盐晶体混悬液,注入膝关节腔,伸曲、旋转运动 10min。
2.根据权利要求1所述的痛风性关节炎动物模型的构建方法,其特征是所述高蛋白质高钙饲料主要成分比例为玉米粉 50%、豆粕 30%、进口鱼粉 6%、钙粉 7%、磷酸钙粉 7%。
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