[发明专利]一种基于近红外光谱技术测定中药材中马兜铃酸I含量的方法

说明书

本发明涉及一种基于近红外光谱技术测定中药材中马兜铃酸I含量的方法，首先，制备马兜铃酸I淀粉定性样品、川木通定性样本及关木通定性样本；制备关木通淀粉定量样品；然后，采集定性样品的近红外光谱图，利用主成分分析法，建立定性分析模型；采集定量样品的近红外光谱图，采用偏最小二乘法，建立定量分析模型；最后综合定性分析模型与定量分析模型，获得中药材中马兜铃酸I的含量；其中，近红外光谱图的获取条件为扫描范围为4000‑10000 cm^‑1，在室温25℃下测定，以空气作为背景，分辨率为8 cm^‑1，扫描次数为32。本发明构建一种无损、简便且适用性广的方法，为含马兜铃酸I的中药材以及中成药质量标准的建立及技术审评提供科学依据。

技术领域

本发明涉及中药材中马兜铃酸I检测技术领域，特别是一种基于近红外光谱技术测定中药材中马兜铃酸I含量的方法。

背景技术

中草药在我国已历经数千年，经过我们祖先祖祖辈辈的长期使用被证明是有效的，从而形成了灿烂的中医药文化。其中，马兜铃、关木通、广防己、朱砂莲、大叶马兜铃、汉中防己、寻骨风等药用的马兜铃科马兜铃属植物因其具有镇痛、消炎、祛痰、利尿、调节血压、抗生育活性等作用在临床上得到了广泛的应用。然而，这些中药含有马兜铃酸I(aristolochic acid,AA)及其衍生物，长期服用可能造成慢性肾衰竭以及肾小管病变(又称“中草药肾病”)。而且，马兜铃酸I的累积剂量是尿路上皮癌的一个重要危险因素，致使晚期中草药肾病的尿路上皮癌发病率较高。因此，部分中草药和中成药在国外遭到禁用，中药国际化进程受到巨大影响。2017年Science子刊Science Translational Medicine封面文章报道了马兜铃酸I可以诱发肝癌，致使亚洲地区肝癌患病率高于其它地区。越来越多关于马兜铃酸I类物质对人体危害性的报道，引起人们对马兜铃酸I类物质检测技术的重视。马兜铃酸I主要存在于马兜铃科马兜铃属、细辛属植物中，包括马兜铃酸I和马兜铃酸Ⅱ，还含少量的马兜铃酸Ⅲ。目前，已有文献对于含多种中药材中马兜铃酸I含量测定方法的报道，但一般是一种检测方法只针对一种药材，缺乏比较系统的研究，又或者测定前期处理复杂，测定成本高且效率较低。因此，建立一种准确可靠、简便易行、低成本且适用于多数中药材中马兜铃酸I含量测定的方法，对于指导临床采取防范措施以及更合理用药具有重大意义。

与传统分析技术相比，近红外光谱(Near infrared spectroscopy，NIR)技术能在几十秒甚至几秒内，仅通过对样品的一次红外简单测量，就能同时测定一个样品的几种甚至几十种物质的浓度数据，而且具有被测样品用量很少、无破坏、无污染、无损伤、操作简单、分析成本低等优势。近红外光谱技术最早应用于农副产品分析，后逐渐被应用到石油化工、制药与临床医学、生物化工、环境科学、食品工业等领域，并逐步发展到精确检测食品中所含有氨基酸、葡萄糖、微量元素等的含量，但其在马兜铃酸I检测中的应用目前并未见诸报道。这主要由于中药材样本成分复杂，其近红外光谱出现重叠，限制了近红外光谱的在中药材成分检测方面的应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提出一种基于近红外光谱技术测定中药材中马兜铃酸I含量的方法，利用近红外光谱(NIR)结合主成分分析法(Principal ComponentsAnalysis，PCA)对中药材中马兜铃酸Ⅰ含量进行定性分析，并利用近红外光谱结合偏最小二乘法(Partial Least Squares，PLS)对不同浓度的马兜铃酸I含量进行检测并建立定量分析模型，构建一种无损、简便且适用性广、成本低的方法。

本发明采用以下方案实现：一种基于近红外光谱技术测定中药材中马兜铃酸I含量的方法，包括以下步骤：

步骤S1：制备马兜铃酸I淀粉定性样品、川木通定性样本及关木通定性样本；

步骤S2：制备关木通淀粉定量样品；

步骤S3：采集定性样品的近红外光谱图，利用主成分分析法，建立定性分析模型；