[发明专利]一种猪脾转移因子与鸡法氏囊素混合液的制备方法和应用

权利要求书

1.一种猪脾转移因子与鸡法氏囊素混合液的制备方法，包括如下步骤：

1)将猪脾脏、鸡法氏囊和水混合后匀浆，得到匀浆液；

2)将所述步骤1)的匀浆液反复冻融5～7次，得到冻融液；

3)将所述步骤2)的冻融液离心，将得到的上清液采用β-丙内酯灭活，得到灭活液；

4)将所述步骤3)的灭活液在35～42℃条件下进行水解1～3h后离心，得到水解上清液；

5)将所述步骤4)的水解上清液进行超滤、除菌，将得到的无菌液浓缩，得到猪脾转移因子与鸡法氏囊素混合液；所述浓缩后的混合液的体积为无菌液体积的19％～21％。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中猪脾脏的质量、鸡法氏囊的质量与水的体积比为(0.5～1.5):(0.5～1.5):(1～4)。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中匀浆的转速为15000～18000r/min，匀浆的时间为9～11min。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中反复冻融时，冷冻的温度独立为-22～-18℃；融解的温度独立为20～30℃。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，按体积百分比计，所述步骤3)灭活液中β-丙内酯的终浓度为0.014～0.016％；所述灭活的温度为5～15℃，所述灭活的时间为20～30h。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤5)超滤使用的超滤膜的截留分子量为5～8kD。

7.根据权利要求1或6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤5)中除菌的方式为采用除菌过滤器进行过滤除菌，所述除菌过滤器的滤膜孔径为0.1μm。

8.根据权利要求1或6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤5)中浓缩的温度为9～11℃。

9.权利要求1～9任意一项所述方法制备得到的猪脾转移因子与鸡法氏囊素混合液。

10.权利要求9所述的猪脾转移因子与鸡法氏囊素混合液在制备疫苗中的应用。