[发明专利]一种用于关节保护的药用组合物的制备方法及其质量分析方法

权利要求书

1.一种用于关节保护的尪痹制剂的质量分析方法，其特征在于，包括：

对尪痹制剂中独活、白芍、知母、防风分别进行薄层鉴别；

采用一标多测法，以淫羊藿苷为内标物，检测尪痹制剂中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的质量；

采用高效液相法测定白芍中芍药苷含量；

采用凯氏定氮法对尪痹制剂中的蛋白质的含量进行测定；

所述一标多测法的具体步骤为：

1)制取尪痹制剂供试品溶液；

2)分别制取朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷对照品溶液；

3)分别吸取步骤2)所述的对照品溶液，注入高效液相进行测试，记录相对保留时间、峰面积，绘制相应的标准曲线，计算出朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的校正因子F；所述高效液相检测条件为：采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱、流动相为乙腈-0.1％磷酸水、等度洗脱、流速1.0ml/min、柱温30℃、检测波长为270nm；流动相中乙腈：0.1％磷酸水为24:76；

4)吸取步骤1)制取尪痹制剂供试品溶液，注入高效液相，测定，根据步骤3)的相对保留时间和校正因子F对供试品溶液朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷进行定量测定；

所述采用高效液相法测定白芍中芍药苷含量中，用于测定白芍中芍药苷含量的供试品溶液采用超声提取法提取；所述高效液相法的具体检测条件为；Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱、以乙腈为流动相A，以0.01％三氟乙酸水为流动相B，流速1.0ml/min、柱温30℃，按下表中的规定进行梯度洗脱；

所述尪痹制剂采用如下方法制备：

组分1：取1/2处方量的白芍和1/2处方量的知母用粉碎机粉碎，再用振动式超微粉碎机粉碎1.5小时即得；

组分2：取羊骨破碎成小段，高温高压提取，提取条件为压力0.10MPa、时间2小时、2倍水，过滤，离心，浓缩，得羊骨提取浓缩液；羊骨提取浓缩液有油脂层和水溶液采用高压微射流均质机进行匀质处理，800bar，重复均质4次，即得；

组分3：取独活、桂枝，加6倍水，直通蒸汽进行提取，提取4-6小时，收集得到挥发油，剩余药液过滤浓缩备用；取纯化水，β-环糊精置容器中搅拌均匀，倒入胶体磨中，在研磨状态下加入挥发油，包合时间为30-60分钟，接冷凝水，包合温度控制在30-40℃之间，即得挥发油包合物；β环糊精：挥发油为10:1；

组分4：取地黄、熟地黄、骨碎补、狗脊加水煎煮2次，8倍量、2h，6倍量、1h；过滤，合并滤液，浓缩，得到水提取浓缩液；将水提取浓缩液与组分3中挥发油提取的剩余药液浓缩液混合均匀，即得水提取组合物；

组分5：制附子、续断、淫羊藿、防风、威灵仙、皂角刺、伸筋草、红花以及剩余的1/2处方量的白芍和剩余的1/2处方量的知母药材水提取后浓缩成水煎液：生药量＝1:1，调节药液pH值为5，加入到高压匀质机设定压力600bar，匀质4次，然后加3倍乙醇搅拌，静置过夜，取上清回收乙醇浓缩成浸膏即得；

取组分4、组分1作为底粉，用一步制粒机制成颗粒，其他组分干燥，制成微丸，将颗粒、微丸整粒后压片，包衣，即得尪痹制剂。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的校正因子F分别为0.7691、0.7906、0.8545和1.0000。