[发明专利]沉积物中DNA的预处理方法有效
| 申请号： | 201811160620.6 | 申请日： | 2018-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN109321562B | 公开（公告）日： | 2021-10-08 |
| 发明（设计）人： | 范俊韬;闫振广;郑欣;郭芬;王鹏远 | 申请（专利权）人： | 中国环境科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 李冉 |
| 地址： | 100000 *** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 沉积物 dna 预处理 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种沉积物中DNA的预处理方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)取5～10kg沉积物，加入4～6倍重量的水，搅拌混匀，沉降15～20min；
(2)取上清5～10L，加入100～200g明矾，100～200g焦磷酸钠，搅拌混匀，沉降10～15min；
(3)取上清3～6L，加入50～100g Tris，40～80g聚乙烯吡咯烷酮，23～47g NaCl，2～4gTritonX-100，搅拌混匀，沉降15～20min；
(4)取上清1.5～3L，经0.22um灭菌膜过滤，收集滤膜，将其剪碎置于无菌离心管中，加入无菌水，涡旋震荡，离心，取上清液，提取DNA。
2.根据权利要求1所述的一种沉积物中DNA的预处理方法，其特征在于，步骤(1)所述沉积物为河流底泥。
3.根据权利要求1所述的一种沉积物中DNA的预处理方法，其特征在于，步骤(3)中还加入50～100g脱脂奶粉。
4.根据权利要求1所述的一种沉积物中DNA的预处理方法，其特征在于，步骤(4)取上清1.5～3L，经0.22um灭菌膜过滤，收集滤膜，将其剪碎置于10mL无菌离心管中，加入2～4mL无菌水，涡旋震荡5～10min，8000～12000rpm离心5～10min，取上清液，提取DNA。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国环境科学研究院，未经中国环境科学研究院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811160620.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
