[发明专利]一种提取水培植物基因组DNA的试剂盒及提取方法

权利要求书

1.一种提取水培植物基因组DNA的试剂盒，其特征在于，包括样品缓冲液、DNA提取液、体积比24:1的氯仿：异戊醇混合液、异丙醇、体积分数70％～75％的乙醇溶液、ddH₂O、纤维素酶；

所述样品缓冲液为100～150g/L的葡萄糖溶液；

所述DNA提取液的配方如下：CTAB 2g、NaCl 1.4mol、0.5mol/L pH8.0的EDTA溶液4mL、1mol/L pH8.0的Tris-HCl溶液10mL、β-巯基乙醇2.5mL，双蒸水定容至100mL。

2.根据权利要求1所述的提取水培植物基因组DNA的试剂盒，其特征在于，所述样品缓冲液为100g/L的葡萄糖溶液或者150g/L的葡萄糖溶液。

3.一种利用权利要求1所述的试剂盒提取水培植物基因组DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，样品预处理：将采集的水培植物组织与样品缓冲液混合，研磨5～10min，加入样品75mg/mL的纤维素酶溶液，置于37℃15min，得到破壁溶液；

S2，提取：向破壁溶液中加入1～2倍体积的DNA提取液，混匀，65℃水浴加热20～40min，离心，收集上清液；

S3，除蛋白：向上清液中加入等体积的体积比24:1的氯仿：异戊醇混合液，上下颠倒混匀3min，静置几秒，吸取上层溶液；

S4，沉淀：向上层溶液中加入0.6倍体积的经4℃预冷的异丙醇，混匀，-20℃放置30～60min，离心，弃上清，收集DNA沉淀；

S5，清洗：在DNA沉淀中加入体积分数70％～75％的乙醇溶液，混合，离心，弃上清，最后置于通风处风干；

S6，溶解：风干的DNA沉淀用ddH₂O溶解，-20℃保存备用。

4.根据权利要求3所述的提取水培植物基因组DNA的方法，其特征在于，S1中，水培植物组织与样品缓冲液的比例为1g:1mL。

5.根据权利要求3所述的提取水培植物基因组DNA的方法，其特征在于，S2中，离心的条件为4℃、6000r/min离心5min。

6.根据权利要求3所述的提取水培植物基因组DNA的方法，其特征在于，S2、S4中离心的条件均为4℃、10000rpm离心10min。

7.根据权利要求3所述的提取水培植物基因组DNA的方法，其特征在于，S3中，静置时间为3～10秒。