[发明专利]一种定性检测嗜热链球菌的引物及方法

说明书

本申请提供一种用于定性检测嗜热链球菌S10(Streptococcus thermophilus S10)的特异性引物以及利用该引物定性检测嗜热链球菌S10的方法，所述嗜热链球菌S10的微生物保藏编号为CGMCC No.16129，所述特异性引物中上游引物的序列SEQ No.1所示；下游引物S10R的序列如SEQ No.2所示，本申请提供的引物特异性好、灵敏度高、稳定性好、重复性好，使用该特异性引物目的菌株嗜热链球菌S10进行PCR分析，从而实现对嗜热链球菌S10快速准确地定性检测，特别是对发酵乳制品中嗜热链球菌S10的定性检测。

技术领域

本申请属于基因工程技术领域，特别涉及一种定性检测嗜热链球菌S10的引物、试剂盒及定性检测方法。

背景技术

嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)是一种低GC含量(GC含量是指在DNA的4种碱基中，鸟嘌呤和胞嘧啶所占的比率)、兼性厌氧、过氧化氢酶阴性、不形成芽孢、革兰氏染色阳性非致病性、同型发酵的乳酸菌。嗜热链球菌是“公认安全性(GRAS)”菌株，被广泛应用于一些重要的发酵乳制品的工业生产中，是继乳酸乳球菌之后的第二个重要的工业乳酸菌，市场价值约400亿美元。嗜热链球菌常与保加利亚乳杆菌一起作为发酵剂广泛应用于酸奶、奶酪和其他乳制品的工业生产中。

嗜热链球菌具有酸化能力，蛋白水解酶活性，增长快速，能够产生胞外多糖、细菌素、风味物质及抗噬菌体等特点，直接或间接影响着发酵乳的质量，其中酸化能力，蛋白水解酶活性，胞外多糖与风味物质的产生能力是筛选生产菌株的关键特性。

嗜热链球菌S10是一株分离自我国传统发酵乳制品中发酵性能优异的乳酸菌。嗜热链球菌S10产酸速率较快，发酵7小时可以使发酵乳的pH到达4.6。嗜热链球菌S10的发酵性能优异，适合作为发酵剂在工业使用。

嗜热链球菌包括多达千株以上的具体菌株，因此，亟需一种定性检测发酵制品中是否含有嗜热链球菌S10菌株的方法。

发明内容

本申请的目的是提供一种定性检测嗜热链球菌S10的引物及方法，从而能够以发酵制品为样本快速定性检测发酵制品中是否含有嗜热链球菌S10。

本申请的目的是通过如下技术方案实现的：

本申请所述嗜热链球菌S10(Streptococcus thermophilus S10)分离自我国传统发酵乳制品，具体地，是通过如下方法分离筛选得到的：

嗜热链球菌S10(Streptococcus thermophilus S10)分离自我国青海自然发酵酸牛乳中，通过TPY选择性培养基分离，通过挑取单个菌株扩配得到。

本申请将该菌株提交专利认可的机构进行保藏，其微生物保藏编号为：CGMCCNo.16129；分类命名为：嗜热链球菌Streptococcus thermophilus(Streptococcusthermophilus S10)；保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心(国家专利局指定专利微生物保藏中心)；保藏时间：2018年7月17日；保藏地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

本申请所分离的嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)S10具有如下生物学特性：嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)隶属于链球菌属，革兰氏阳性菌。细胞形态呈现圆球形或者椭圆形，链状排列，且无芽孢无鞭毛，长0.7～1.1μm，宽0.6～0.9μm，呈成对，或短链状出现，最适生长条件为38～43℃，pH6.0～7.0。