[发明专利]反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒有效
申请号: | 201811182548.7 | 申请日: | 2018-10-11 |
公开(公告)号: | CN109212194B | 公开(公告)日: | 2020-06-16 |
发明(设计)人: | 任永茂;靳增明;渠海;郑业焕;付光宇;吴学炜 | 申请(专利权)人: | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/535 | 分类号: | G01N33/535;G01N33/543;G01N33/76;G01N21/76 |
代理公司: | 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 | 代理人: | 王霞 |
地址: | 450016 河南省郑州*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 反三碘 甲状腺 氨酸 定量 检测 试剂盒 | ||
1.一种反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒,其特征在于:包括包被有反三碘甲状腺原氨酸抗体的磁微粒混悬液,含有辣根过氧化物酶标记的反三碘甲状腺原氨酸酯类衍生物的酶结合物,解离液,反三碘甲状腺原氨酸系列校准品,发光底物A 液、发光底物B 液及浓缩洗液;
其中,所述酶结合物采用活化剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺将辣根过氧化物酶上的羧基活化,然后加入反三碘甲状腺原氨酸酯类衍生物,使衍生物上的氨基与活化过的羧基缩合为酰胺化合物,透析后得到反三碘甲状腺原氨酸酯类衍生物酶标抗原;最后用含有0.1-3% BSA的0.01M PBS 缓冲液进行稀释而得;
所述反三碘甲状腺原氨酸酯类衍生物包括反三碘甲状腺原氨酸甲酯、反三碘甲状腺原氨酸乙酯、反三碘甲状腺原氨酸丙酯。
2.根据权利要求1所述的反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒,其特征在于:所述磁微粒混悬液是采用羧基磁微粒,用活化剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺在pH为3.5-5.5的条件下进行活化,加入适量的反三碘甲状腺原氨酸抗体,用含有0.1-3%BSA的的0.01MPBS 缓冲液进行封闭,最后加入封闭液进行保存;其磁微粒的最终浓度为0.1-1.0 mg/ml。
3.根据权利要求1所述的反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒,其特征在于:所述解离液是由纯化水、Tris、NaCl、Proclin300、解离剂ANS配制而成,其中1000ml纯化水中添加有Tris 6.05g,NaCl 8.5g,Proclin300 2ml,解离剂ANS 1-3g。
4.根据权利要求1所述的反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒,其特征在于:所述反三碘甲状腺原氨酸系列校准品是用含有1%-3% BSA 和0.1-0.3% PC300 的Tris-NaCl缓冲液将反三碘甲状腺原氨酸纯品配制成的标示浓度为0nmol/L、0.25nmol/L、0.5nmol/L、1.0nmol/L、2.5nmol/L、5.0nmol/L 的一系列校准品。
5.根据权利要求1所述的反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒,其特征在于:所述发光底物A 液由0.2M Tris-Hcl、0.15mM Luminol、0.59mM 羟基香豆素和0.59mM 没食子酸配制而成;所述发光底物B 液由0.2M 乙酸- 乙酸盐缓冲、0.85mM 氨基酸氧化酶、0.008Tween20、0.5mM 二乙烯三胺五乙酸、0.12mM 维生素C 配制而成。
6.根据权利要求1所述的反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒,其特征在于:所述浓缩洗液由NaH2PO4·2H2O、Na2HPO4·12H2O、NaCl、Tween 20、蒸馏水配制而成,其中1000ml蒸馏水中含有NaH2PO4·2H2O 4.6g、Na2HPO4·12H2O 62.32g、NaCl 175.6g、Tween 20 2-10ml。
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