[发明专利]反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒，包括包被有反三碘甲状腺原氨酸抗体的磁微粒混悬液，含有辣根过氧化物酶标记的反三碘甲状腺原氨酸酯类衍生物的酶结合物，解离液，反三碘甲状腺原氨酸系列校准品，发光底物A 液、发光底物B 液及浓缩洗液。本发明试剂盒采用了标记抗原类似物的方法，因此能与该激素的抗体进行特异性结合，但与甲状腺结合蛋白(TBG)的结合能力却大为降低，在很大程度上减小了结合蛋白对测量系统的影响。此外，基于高灵敏度的化学发光测定技术，配合高特异性的免疫反应，使得本发明检测试剂盒具有灵敏度高，特异性强和检测范围宽的优点，能与全自动仪器配合使用，实现全自动化检测。

技术领域

本发明涉及体外诊断技术，尤其是涉及一种反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒。

背景技术

反三碘甲状腺原氨酸（rT3）是正常人血清中含有的一种甲状腺分泌激素，其含量仅次于T4（90%）和T3（9%），占甲状腺分泌激素的0.9%，循环中95%的rT3由T4在肝、肾、垂体及心肌等组织中经5-脱碘酶脱去酪氨酸环上的一个碘而生成。98%的rT3结合在血清结合蛋白上，故血清结合蛋白的含量明显影响rT3的测定结果。rT3在体内的降解速度较快，其半衰期为30～60min。

一些甲状腺相关疾病，如Graves甲亢病人，rT3的升高与T3、T4水平基本平行，经抗甲亢药物和β受体阻滞剂心得安治疗后，rT3随T3、T4的下降而降低，但下降速度比T3、T4要慢，依次是T3＞T4＞rT3，这种情况可能是β受体阻滞剂抑制5’-脱碘酶的活性，使T4向T3转化减少，向rT3方向转化增加以及抗甲状腺药物使rT3的清除率下降所致。

在某些轻型甲亢、甲减，如亚临床甲减及慢性淋巴细胞性甲状腺炎随访过程中，rT3的变化甚至早于T3、T4。尽管rT3在甲状腺中合成量很少，诊断价值不如T3、T4，但甲亢病情的微小变化仍可通过对5-脱碘酶活性的影响，迅速的反应在rT3水平的变化上。因此，检测rT3有助于甲亢、甲减的诊断，尤其是对轻型甲亢、甲减，rT3的变化可能较T3、T4更敏感。

在甲状腺疾病治疗过程中，甲减治疗好转患者的rT3/T3值低于正常，但T3基本恢复正常，提示rT3恢复正常的速度较慢，若要较全面的判断甲状腺的功能状态，需要结合T3，T4，TSH等的综合分析，若T3，rT3同时升高，则提示用药过量。使用抗甲抗药物治疗后，随着甲亢症状的减轻，血清rT3水平随T3，T4的下降而降低，rT3的降低较T3、T4慢，此可能与药物抑制5’-脱碘酶的活性，使T4向T3转化减少，向rT3转化增加，或与rT3的代谢清除率下降有关，因此甲亢治疗过程中rT3水平恢复等过程较慢，若rT3降低则提示药物过量。因此血清rT3的测定可用于监测用药。

妊娠时，羊水中的rT3含量较高，新生儿脐血中rT3的含量明显高于成人，而T3含量略低。高水平的rT3易于测定，因此，rT3的测定能够更准确的反映出胎儿和新生儿甲状腺功能状态，可用于先天性甲状腺功能低下的诊断。

目前，临床上测定血清rT3的方法主要是采用放射性免疫法。此方法存在诸多弊端，如：检测时间长；纯手工加样操作繁琐，效率低，容易导致实验结果误差大；且检测特异性低，灵敏度较差，检测范围窄；易受外部干扰因素影响，如温度、时间及材料浓度影响；放射性免疫法还存在放射性污染、标记物半衰期短、对操作者具有放射性损伤等缺陷。

化学发光技术兴起于上个世纪80年代，是继放免技术和酶联免疫技术之后发展起来的新兴技术，由于其高灵敏度、高特异性，同时方法简便、快速，标记结合物稳定，无放射性同位素损伤和污染等特点，在近些年得到了飞速发展。免疫磁微粒技术是近几年新兴技术，它是利用高分子合成一定粒度大小的磁性固相微粒做载体，载体表面修饰有一定数量的化学功能团，可通过化学偶联等方法包被上具有特异性亲和力的免疫活性物质，具有分离速度快、效率高、可重复性好、反应均相等诸多优点。但时至今日，还未有基于化学发光测定技术而制备的反三碘甲状腺原氨酸定量检测试剂盒问世。

发明内容