[发明专利]利用钛基介孔硅胶复合材料提取三角帆蚌缩醛磷脂的方法

权利要求书

1.利用钛基介孔硅胶复合材料提取三角帆蚌缩醛磷脂的方法，其特征在于包括以下步骤：

A、三角帆蚌预处理：

将三角帆蚌洗净去壳、去除囊腺、取肌肉组织清洗后制成糜状，干燥后制粉，得三角帆蚌粉A1；

B、粗脂提取：

在三角帆蚌粉A1中加入有机溶剂Ⅰ后充分混合均匀，搅拌提取2±0.5h；

然后加入水，震荡后离心，取下清液；将下清液干燥，得到脂质粗提物B1；

向脂质粗提物B1中加入冷丙酮，所得沉淀为磷脂粗提物B2；

有机溶剂Ⅰ为1,2二氯乙烷：甲醇＝1：2体积比的混合液；

C、碱性反应：

向步骤B所得的磷脂粗提物B2加入有机溶剂II，使磷脂粗提物B2溶解；随后加入含有碱性物质的有机溶剂III，室温反应30±10min；

在反应所得物中加入萃取液IV，震荡后离心，将下清液干燥，然后使用有机溶剂II复溶，得到碱性反应物C1；

有机溶剂II为1,2二氯乙烷：甲醇＝1：1体积比的混合液；

含有碱性物质的有机溶剂III为氢氧化钠甲醇水溶液，其中氢氧化钠：甲醇：水＝14g：960mL：40mL；

萃取液IV为1,2二氯乙烷：水＝5：3体积比的混合液；

D、制备钛基介孔硅胶复合材料：

分别取溴代十六烷基吡啶、尿素，加入水后混合均匀，继续加入环己烷、异丙醇混合均匀；在搅拌条件下滴加正硅酸四乙酯，得到混合物D1；溴代十六烷基吡啶：尿素：水：环己烷：异丙醇：正硅酸四乙酯＝6g：3g：150mL：150mL：5mL：15mL的用量比；

将混合物D1回流反应24±2h；反应结束后过滤，所得滤饼先用乙醇、水润洗，干燥后于500±50℃煅烧4±0.5h，得到介孔硅胶D2；

向乙醇中加入钛酸四叔丁酯，混合后加热至60±10℃，保温条件下再加入所述介孔硅胶D2后混合均匀、搅拌至干，然后静置于100±10℃反应12±2h，得到反应产物D3；所述介孔硅胶D2：乙醇：钛酸四叔丁酯＝8g：140mL：35g的用量比；

向水热反应釜中加入反应产物D3和水，于60±10℃反应6±1h，反应结束后过滤，所得滤饼于500±50℃煅烧5±0.5h，得到钛基介孔硅胶复合材料；所述反应产物D3：水＝1g/20±5mL；

E、缩醛磷脂分离纯化：

将钛基介孔硅胶复合材料填装于层析柱，将步骤C所得的碱性反应物C1加入层析柱内，先使用有机溶剂V淋洗层析柱10±2min，再使用有机溶剂VI淋洗层析柱30±5min，收集有机溶剂VI对应的淋洗液，干燥后得到缩醛磷脂；

所述有机溶剂V为乙腈：水：甲酸：甲酸铵＝950mL：50mL：1mL：125mg的用量比混合而成；所述有机溶剂VI为乙腈：水：甲酸：甲酸铵＝700mL：300mL：1mL：750mg的用量比混合而成；所述淋洗的流速为5mL/min。

2.根据权利要求1所述的利用钛基介孔硅胶复合材料提取三角帆蚌缩醛磷脂的方法，其特征在于所述步骤B中：

三角帆蚌粉A1与有机溶剂Ⅰ的料液比为1g/25±5mL；所述水的用量为有机溶剂Ⅰ的0.6±0.1体积倍；所述冷丙酮温度为0℃，用量为有机溶剂Ⅰ的0.2±0.05体积倍。

3.根据权利要求1所述的利用钛基介孔硅胶复合材料提取三角帆蚌缩醛磷脂的方法，其特征在于所述步骤C中：

溶解时，步骤B中的三角帆蚌粉A1与有机溶剂II的料液比为1g/30±5mL；

步骤B中的三角帆蚌粉A1与含有碱性物质的有机溶剂III的料液比为1g/5±1mL；

步骤B中的三角帆蚌粉A1与萃取液IV的料液比为1g/50±5mL；

复溶时，步骤B中的三角帆蚌粉A1与有机溶剂II的料液比为1g/1±0.1mL。