[发明专利]一种烟曲霉素的提取纯化方法有效
申请号: | 201811192500.4 | 申请日: | 2018-10-13 |
公开(公告)号: | CN109053638B | 公开(公告)日: | 2020-07-31 |
发明(设计)人: | 李建宋;王继栋;张辉;姜南;张延青;钱娉婷;邓爱文;应灵萍;滕云;郑玲辉 | 申请(专利权)人: | 浙江海正药业股份有限公司 |
主分类号: | C07D303/16 | 分类号: | C07D303/16;C07D301/32 |
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地址: | 318000 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 曲霉 提取 纯化 方法 | ||
1.一种烟曲霉素的提取纯化方法,其特征在于,包括下述步骤:
步骤a):烟曲霉素发酵液经甲基叔丁基醚或乙基叔丁基醚搅拌、静置、分液,得到甲基叔丁基醚或乙基叔丁基醚萃取相;
步骤b):将步骤a)得到的甲基叔丁基醚或乙基叔丁基醚萃取相浓缩至原体积的1/30~1/40,然后降温、搅拌,过滤得到烟曲霉素湿固体;
步骤c):将步骤b)得到的烟曲霉素湿固体用有机溶剂①溶解、过滤得滤液①,滤液①在减压下搅拌,同时向滤液①中加入C1-C2醇,结晶8-12h,过滤得到烟曲霉素粗品;
步骤d):将步骤c)得到的烟曲霉素粗品用有机溶剂②溶解、过滤得滤液②,滤液②在减压下搅拌,同时向滤液②中加入C1-C2醇,结晶8-12h后过滤、干燥得到烟曲霉素成品;
所述步骤c)中有机溶剂①或步骤d)中有机溶剂②为氯代烃或氯代烃与C1-C2醇的混合溶剂,所述氯代烃为二氯甲烷或三氯甲烷,所述C1-C2醇为甲醇或乙醇;所述步骤a)、步骤b)、步骤c)和步骤d)均在避光下进行;
所述烟曲霉素发酵液是烟曲霉素产生菌经过发酵制得的,烟曲霉素产生菌为青霉(Penicillium sp.)HS-NF-684Z,其保藏编号为CGMCC No.14144。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤a)中MTBE或ETBE与烟曲霉素发酵液的体积比为1.5:1~3:1。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述步骤a)中搅拌的时间为1~5h,所述步骤b)中搅拌的时间8~12h。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述步骤b)中降温是指温度降到0~15℃。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述步骤c)中烟曲霉素湿固体与有机溶剂①的质量体积比为1:4~1:8,单位为kg/L;所述步骤d)中烟曲霉素粗品与有机溶剂②的质量体积比为1:4~1:8,单位为kg/L。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述步骤c)中加入C1-C2醇的方式为滤液①减压搅拌1h后加入0.3~0.5倍滤液①体积的C1-C2醇,之后每1h加入0.3~0.5倍滤液①体积的C1-C2醇;所述步骤d)中加入C1-C2醇的方式为滤液②减压搅拌1h后加入0.3~0.5倍滤液②体积的C1-C2醇,之后每1h加入0.3~0.5倍滤液②体积的C1-C2醇。
7.根据权利要求1或6所述的方法,其特征在于,所述步骤c)或步骤d)中氯代烃与C1-C2醇的混合溶剂中C1-C2醇的体积不超过氯代烃的体积。
8.根据权利要求1或6所述的方法,其特征在于,所述步骤c)或步骤d)中减压时压力为-0.08~-0.1MPa。
9.根据权利要求1或6所述的方法,其特征在于,所述步骤c)或步骤d)中结晶的温度为-10~8℃。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述烟曲霉素发酵液是烟曲霉素产生菌经过有氧发酵制得的。
11.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤c)中所加入C1-C2醇的体积为滤液①体积的3~10倍。
12.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤d)中所加入C1-C2醇的体积为滤液②体积的3~10倍。
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