[发明专利]靶向肝星状细胞的脂质纳米颗粒、其制备方法和用途

说明书

本发明提供一种靶向肝星状细胞的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述脂质纳米颗粒为油包水型脂质纳米颗粒，包括治疗成分和递送成分，所述治疗成分为抑制HMGB1基因表达的siRNA，所述递送成分含有磷脂多肽DSPE‑PEG‑pPB、阳离子脂质DlinMC3、聚乙二醇修饰的脂质、磷脂和胆固醇。本发明还提供一种靶向肝星状细胞的脂质纳米颗粒的制备方法，通过制备装置将含有siRNA的水相溶液、含有脂类的油相溶液和稀释液同时等速挤出以形成油包水型的脂质纳米颗粒溶液，收集并超滤离心所述脂质纳米颗粒，所述制备装置包括至少三个液体注入装置、液体输出端以及多孔接头。

技术领域

本发明涉及基因治疗和siRNA递送技术领域，具体而言，涉及靶向肝星状细胞的脂质纳米颗粒、其制备方法和用途。

背景技术

RNA干扰技术是一种有效抑制(沉默)基因表达、在各大疾病治疗中均具有广阔应用前景的技术。siRNA(small interfering RNA,小干扰RNA)能够抑制特定细胞相关的基因表达,从而达到抑制特定细胞的生长的目的。然而遗憾的是,然而，裸露的siRNA有着极易被核酶降解、细胞内吞效果差和无靶向性等缺点。因此，选择合适的siRNA递送系统是发挥其强大的基因沉默效果的关键。

HMGB1(High-mobility group box 1)蛋白是一种常驻核内的DNA结构稳定蛋白，可被免疫细胞主动释放或细胞坏死被动释放至胞质再进入血液，作为促炎症因子在肝硬化晚期发挥持续性的促炎症效果。用HMGB1-siRNA来沉默肝硬化时期HMGB1的表达，可以抑制持续性慢性炎症，减轻纤维化程度，从而有效治疗肝硬化。

外源基因的递送系统分为病毒递送系统和非病毒递送系统两大类，其中非病毒递送系统以其安全性、低毒性、低免疫反应、靶向性及易于组装等优点备受关注。非病毒递送系统以基因治疗中基因核苷酸序列作为药物,从药剂和药理学的角度将基因导入靶细胞或组织、器官并进行表达。目前常用的载体材料有两大类：脂质分子与阳离子聚合物。

脂质分子生物相容性较好，化学结构上具有亲疏水两端，由此带来的亲疏水作用力可以将siRNA包裹于脂质体内部，但包封率低、不能有效压缩负电性的siRNA。阳离子聚合物既具有亲疏水两端又具有正电性，既可以依靠亲疏水作用力将siRNA包裹于内部，又可以与负电性的siRNA结合从而有效压缩siRNA提高包封率，但由于聚合物在生物体内难以降解，因此阳离子聚合物的生物相容性不好，成药性差。

因此，本领域仍然需要一种能够有效递送siRNA的新型递送系统，既具有良好的生物相容性也能通过亲疏水作用力和正负电荷吸引力将siRNA包裹于纳米颗粒内部，而且不易被核酶降解并具有优良的细胞内吞效果和优良的靶向性。

发明内容

发明要解决的技术问题

本发明的目的在于克服上述现有技术的载体材料制备的递送系统的不足之处，提供一种对肝星状细胞具有高靶向性的siRNA的新型递送系统。

本发明的另一个目的在于提供一种对肝星状细胞具有高靶向性的脂质纳米颗粒。

本发明的另一个目的在于提供对肝星状细胞具有高靶向性的siRNA脂质纳米颗粒的制备方法。

本发明的另一个目的在于提供对肝星状细胞具有高靶向性的siRNA脂质纳米颗粒在制备治疗肝硬化的药物中的应用。

解决技术问题的技术方案

本发明的目的通过以下技术方案实现：

一种靶向肝星状细胞的治疗成分递送系统，含有治疗成分和递送成分，所述治疗成分为抑制HMGB1基因表达的siRNA，所述递送成分含有磷脂多肽DSPE-PEG-pPB、阳离子脂质DlinMC3、聚乙二醇修饰的脂质(PEG-DMG)、磷脂和胆固醇。

本发明的治疗成分递送系统为油包水型的脂质纳米颗粒。