[发明专利]一种快捷优化单细胞微生物培养基组成的方法在审
申请号: | 201811203749.0 | 申请日: | 2018-10-16 |
公开(公告)号: | CN109207403A | 公开(公告)日: | 2019-01-15 |
发明(设计)人: | 陈国华;何育丰;张慧潓;郝鹏泽;夏进涛;周文艳 | 申请(专利权)人: | 三峡大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/16 |
代理公司: | 宜昌市三峡专利事务所 42103 | 代理人: | 王玉芳 |
地址: | 443002 *** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 单细胞微生物 培养基组成 优化培养基 滤纸片 浸泡 优化 优化培养基配方 功能表达 液体发酵 培养基 灭菌 菌液 筛选 清晰 分配 覆盖 发现 | ||
1.一种快捷优化单细胞微生物培养基组成的方法,其特征在于:所述方法为将需要优化的培养基成分配制成溶液,用灭菌滤纸片浸泡,然后覆盖在浸泡过单细胞微生物菌液的滤纸片上,筛选待优化培养基组成。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述单细胞微生物包括能够产生色素或产生酶类或产生透明圈或其他功能的细菌或酵母菌。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:
1)采集样本;
2)单细胞微生物筛选:样本稀释后,接种于单细胞微生物筛选培养基的平皿上培养,挑选得到能够展示某种功能的单细胞微生物,所述某种功能包括能够产生色素或产生酶类或产生透明圈或其他;
3)挑选单菌落:将步骤2)得到的能够展示某种功能的单细胞微生物挑出,划线形成单菌落,划线获得单细胞微生物单菌落;
4)将步骤3)得到的单细胞微生物单菌落制成菌悬液;
5)将需要优化的培养基成分制成溶液;
6)将灭菌滤纸片沾上所述步骤4)的菌悬液,得到带菌滤纸片,放置在平皿上;
7)将需要优化的培养基成分配制成溶液,用灭菌滤纸片浸泡,得到待优化的培养基组分溶液浸泡后的灭菌滤纸,然后覆盖在步骤6)带菌滤纸片上培养;
8)记录产色素、产酶或者产生透明圈的时间先后或者圈的大小来筛选待优化培养基组成成分,得到优化后的培养基组成。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述步骤1)从自然环境的土壤、水体或者动植物体中采集样品。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述步骤2)、步骤7)的培养时间为1-10 d。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述步骤3)划线次数为2-4次。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述步骤6)灭菌滤纸直径d = 4-8 mm,直径10 cm的平皿放置3-10片带菌滤纸片。
8.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述步骤7)将需要优化的培养基成分种类为若干个时,则依次重叠覆盖在带菌滤纸片上。
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