[发明专利]一种快捷优化单细胞微生物培养基组成的方法

说明书

本发明涉及一种快捷优化单细胞微生物培养基组成的方法，所述方法为将需要优化的培养基成分配制成溶液，用灭菌滤纸片浸泡，然后覆盖在浸泡过单细胞微生物菌液的滤纸片上，筛选待优化培养基组成。本发明可以清晰而快捷地发现促进单细胞微生物功能表达的培养基组成成分，优化培养基。本发明与液体发酵优化培养基配方的方法相比较，具有快速、简便优势。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种快捷优化单细胞微生物培养基组成的方法。

背景技术

细菌是地球上数量多、种类多的一类单细胞原核微生物，与人类关联密切。部分细菌是病原体，部分细菌则为人类利用：如细菌用作生产乳酪、酸奶、抗生素等。酵母是一种单细胞真核微生物，已知种类达1000余种酵母，一些酵母已经成为工农业生产菌种。

细菌和酵母这两类单细胞微生物在工农业生产中具有非常重要的价值，而细菌和酵母赖以生存的培养基对菌体生物量、代谢产物种类和产量影响明显。培养基中含有的碳源、氮源、无机盐、生长调节剂等种类差异可以导致微生物产量与质量变化，因此，微生物产品生产需要对微生物的培养基进行优化，特别是培养基组成成分优化，以期获得最佳经济效益。

目前对微生物培养基组成进行优化的方法基本上采用液体培养，改变碳源、氮源、无机盐、生长因子等培养基组成成分种类，研究培养基组成成分种类对微生物特定代谢产物影响程度，发现关键的影响成分，达到培养基优化的目的。液体发酵法需要使用摇瓶或者试管，发酵后的代谢产物需要进行定性(定量)检测，操作程序多、消耗时间长、费用高。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种快捷优化单细胞微生物培养基组成的方法。适用于细菌和酵母这两类单细胞微生物，且它们的功能可以借助于颜色或者透明圈进行判断。

本发明技术方案如下：

一种快捷优化单细胞微生物培养基组成的方法，所述方法为将需要优化的培养基成分配制成溶液，用灭菌滤纸片浸泡，然后覆盖在浸泡过单细胞微生物菌液的滤纸片上，筛选待优化培养基组成。

优选地，所述单细胞微生物包括能够产生色素或产生酶类或产生透明圈或其他功能的细菌或酵母菌。

优选地，所述方法包括以下步骤：

1)采集样本；

2)单细胞微生物筛选：样本稀释后，接种于单细胞微生物筛选培养基的平皿上培养，挑选得到能够展示某种功能的单细胞微生物，所述某种功能包括能够产生色素或产生酶类或产生透明圈或其他；

3)挑选单菌落：将步骤2)得到的能够展示某种功能的单细胞微生物挑出，划线形成单菌落，划线获得单细胞微生物单菌落；

4)将步骤3)得到的单细胞微生物单菌落制成菌悬液；

5)将需要优化的培养基成分制成溶液；

6)将灭菌滤纸片沾上所述步骤4)的菌悬液，得到带菌滤纸片，放置在平皿上；

7)将需要优化的培养基成分配制成溶液，用灭菌滤纸片浸泡，得到待优化的培养基组分溶液浸泡后的灭菌滤纸，然后覆盖在步骤6)带菌滤纸片上培养；

8)记录产色素、产酶或者产生透明圈的时间先后或者圈的大小来筛选待优化培养基组成成分，得到优化后的培养基组成。

进一步优选地，所述步骤1)从自然环境的土壤、水体或者动植物体中采集样品。

进一步优选地，所述步骤2)、步骤7)的培养时间为1-10d。

进一步优选地，所述步骤3)划线次数为2-4次。

进一步优选地，所述步骤6)灭菌滤纸直径d＝4-8mm，直径10cm的平皿放置3-10片带菌滤纸片。