[发明专利]一种用于鉴别三赞胶、结冷胶和温轮胶的分子标记的引物及分子标记和应用

权利要求书

1.利用一种引物鉴别三赞胶、结冷胶和温轮胶的方法，其特征在于：所述引物为SX-1和SX-2，所述引物SX-1的序列为SEQ ID No.7，所述引物SX-2的序列为SEQ ID No.8；

步骤如下：

以三赞胶、结冷胶和温轮胶合成菌的基因组DNA为模板，用上述引物进行PCR扩增；

通过电泳检测PCR扩增产物，其PCR扩增条带均为560bp；

分别对上述PCR扩增产物进行DNA测序，去除影响测序准确性的引物附近序列，得到代表三赞胶的特异性分子标记396bp，具体序列为SEQ ID No.11，代表结冷胶的特异性分子标记397bp，具体序列为SEQ ID No.12，代表温轮胶的特异性分子标记397bp，具体序列为SEQID No.13，上述分子标记序列能够彼此区分鉴别的目标。

2.根据权利要求1所述的利用一种引物鉴别三赞胶、结冷胶和温轮胶的方法，其特征在于：

PCR扩增体系为：10-30ng/μL的模板DNA 1μL，10 μM的引物SX-1 0.5 μL，10μM的引物SX-2 0.5 μL，10mM的dNTP 0.5 μL，10×缓冲液 2.5 μL，5 U/μL的Taq酶 0.5 μL，加水至25μL；

PCR反应条件为：95℃预变性 5min；94℃ 30-45s，58-61℃ 30-45s，72℃ 45-60s，30个循环；72℃延伸10min。