[发明专利]一种用于鉴别三赞胶、结冷胶和温轮胶的分子标记的引物及分子标记和应用

说明书

本发明涉及一种可以同时扩增三赞胶、结冷胶和温轮胶分子标记的引物，所述分子标记的引物为SX‑1和SX‑2，所述引物SX‑1的序列为SEQ7，所述引物SX‑2的序列为SEQ8。三赞胶特异性分子标记为396bp，序列为SEQ11，结冷胶特异性分子标记为397bp，序列为SEQ12，温轮胶特异性分子标记为397bp，序列为SEQ13。本发明克服了通过多糖结构鉴别微生物胶时，方法复杂，检测时间长，费用昂贵的缺点，通过分子标记鉴别三赞胶、结冷胶和温轮胶，具有检测时间短、准确性高的优点，可以从包含三赞胶、结冷胶和温轮胶的中轻度加工产品中鉴别出这三种微生物胶。

技术领域

本发明属于微生物胶鉴别技术领域，尤其是一种用于鉴别三赞胶、结冷胶和温轮胶的分子标记的引物及分子标记和应用。

背景技术

自然界中的许多微生物都具有合成生物聚合物的能力，这些聚合物主要由多糖组成，它们粘附在细胞表面或以不定形粘液状分泌到培养液中，对微生物有保护作用。一些微生物源的聚合物已经成为重要的生物技术产品，被称为微生物胶，在化工、食品等行业被广泛应用。目前已经商业化应用的微生物胶包括，野油菜黄单孢菌(Xanthomonascampestris)合成的黄原胶，出芽短梗霉(Aureobacidium pullulans)合成的普鲁兰多糖，产碱杆菌属菌株(Alcaligenes sp.)合成的可得然胶，肠膜状明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)合成的右旋糖酐，鞘氨醇单胞菌属菌株(Sphingomonas sp.)合成的鞘氨醇胶(Sphingans)。鞘氨醇胶是鞘氨醇单胞菌属某些菌株合成的一类结构相似的多糖统称，这类多糖的主链都由葡萄糖、葡萄糖醛酸、甘露糖或鼠李糖组成，但多糖的侧链基团种类、位置有极大的多样性，这赋予鞘氨醇胶每一成员独特的物理性质和广泛的用途。目前已商业化开发的鞘氨醇胶包括：少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis ATCC 31461)合成的结冷胶(Gellan)，鞘氨醇单胞菌ATCC 31555(Sphingomonas sp.ATCC 31555)合成的温轮胶(Welan)和三赞鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sanxanigenens)合成的三赞胶(Sanxan)。

结冷胶具有优良的增稠和胶凝性能，主要作为食品胶凝剂、稳定剂使用，近年来也逐渐用于生物医疗领域，作为药物的赋形剂和缓释剂，以及医学组织工程中的三维框架材料。温轮胶具有高粘度和优良的耐盐、耐温性能，主要用于水泥和混凝土中，能够增强泥浆的保水性。三赞胶具有优良的增稠性和剪切稀释性，还可以形成弹性凝胶，在食品领域用作增稠剂、稳定剂和凝固剂。

随着微生物胶应用范围的不断扩展，如何判断一个产品中添加了哪种微生物胶成为一个难题。虽然不同微生物胶的多糖结构各不相同，但组成这些多糖的单糖成分接近，而且食品领域的产品中大都添加有葡萄糖等糖组分，因此仅靠单糖组分的差别无法区分不同的微生物胶。靠多糖的结构差别可以鉴别微生物胶，但多糖的结构比较复杂，在分析方法上有许多困难，例如多糖没有特征吸收光谱，在检测上很不方便，需要纯化多糖和使用核磁共振等复杂的分析方法。

随着鞘氨醇胶的广泛应用，特别是三赞胶应用领域的不断扩展，如何保护三赞胶新产品使用的自主知识产权，规范这类产品的应用市场，成为一个亟需解决的问题，因此需要一种用于鉴定产品中三赞胶、结冷胶和温轮胶的检测技术。

通过检索，尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种用于鉴别三赞胶、结冷胶和温轮胶的分子标记的引物及分子标记和应用，本发明克服了通过多糖结构鉴别微生物胶时，方法复杂，检测时间长，费用昂贵的缺点，通过分子标记鉴别三赞胶、结冷胶和温轮胶，具有检测时间短、准确性高的优点，可以从包含三赞胶、结冷胶和温轮胶的中轻度加工产品中鉴别出这三种微生物胶。

本发明解决其技术问题是采取以下技术方案实现的：