[发明专利]一种制备特立帕肽的新工艺

权利要求书

1.一种特立帕肽的合成方法，包括如下步骤：

步骤一、按照主链C端至N端的氨基酸顺序，固相合成第1-12氨基酸的片段[1-12]肽树脂，所述的片段[1-12]肽树脂侧链上偶联有保护基；

步骤二、按照主链C端至N端的氨基酸顺序，固相合成第13-22氨基酸的肽树脂，切割树脂得片段一；

步骤三、按照主链C端至N端的氨基酸顺序，固相合成第23-34氨基酸的肽树脂，切割树脂得片段二；

步骤四、固相法将片段[1-12]肽树脂脱末端Fmoc后，与片段一偶联反应，得到片段[1-22]肽树脂；

步骤五、固相法将片段[1-22]肽树脂脱末端Fmoc后，与片段二偶联反应，得到特立帕肽树脂；

步骤六：将特立帕肽树脂在裂解剂的作用下进行裂解反应得到特立帕肽粗品；

步骤七：特立帕肽粗品经过纯化、成盐、冻干得到醋酸特立帕肽精肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的片段一、片段二的His、Asp、Gln、Lys、Arg、Trp、Glu、Ser、Asn上有保护基。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的Asn、Gln的侧链保护基为

Trt；His的侧链保护基为Adoc、Boc、Mmt、Mtt或Trt；

Lys、Trp的侧链保护基为Boc或Trt；

Arg的侧链保护基为Boc或Pbf；

Glu的侧链保护基优选OtBu；

Ser的侧链保护基为TES、TMS、TBS、DHP、THP或tBu。

4.一种特立帕肽的合成方法，其特征在于包括如下步骤：

步骤一、将Fmoc-Phe-Wang Resin，加入固相反应器中，在脱保护剂的作用下脱Fmoc反应后与Fmoc-Asn(Trt)-OH在缩合剂的作用下进行偶联反应，然后重复所述的脱保护基反应和偶联反应，按照多肽序列依次连接如下氨基酸Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-Leu-OH及Fmoc-Trp(Boc)-OH，得到所述多肽片段[1-12]肽树脂；

步骤二、将2-CTC Resin与氨基酸Fmoc-Glu(OtBu)-OH在缩合剂的作用下偶联反应得接头树脂，将其进行Fomc脱保护基反应，然后采用逐一固相偶联反应的方式按照多肽序列依次偶联Fmoc-Val-OH、Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-His(Trt)-OH及Fmoc-Lys(Boc)-OH，重复偶联反应和脱保护基反应操作，直至合成得到片段一肽树脂，最后在裂解剂的作用下裂解树脂后得到片段一；

步骤三、将2-CTC Resin加入固相反应器中与氨基酸Fmoc-Gly-OH在缩合剂的作用下偶联反应得到接头树脂，将其进行Fomc脱保护基反应，然后采用逐一固相偶联反应的方式按照多肽序列依次偶联氨基酸Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Val-OH及Fmoc-Ser(tBu)-OH，重复偶联反应和脱保护基反应操作直至合成得到片段二肽树脂，最后在裂解剂的作用下裂解树脂后得到片段二；

步骤四、固相法将片段[1-12]肽树脂末端Fmoc进行脱保护基反应，与片段一在缩合剂的作用下偶联，得到片段[1-22]肽树脂；

步骤五、固相法将片段[1-22]肽树脂末端Fmoc进行脱保护基反应，与片段二在缩合剂的作用下偶联，得到特立帕肽树脂；

步骤六：将特立帕肽树脂在裂解剂的作用下进行裂解反应得到特立帕肽粗品；

步骤七：特立帕肽粗品经过纯化、成盐、冻干得到醋酸特立帕肽精肽。