[发明专利]一种嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠模型的建立和检测方法

权利要求书

1.一种嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠模型的建立和检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将小鼠通过OVA致敏以及激发，建立嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠模型；

(2)将步骤(1)中获得的小鼠置于Buxco无创肺功能检测系统的密闭体描舱内自由活动；其中，Buxco无创肺功能检测系统连接有雾化控制器和信号转换器；

(3)使用乙酰甲胆碱雾化激发小鼠，并通过Finepointe软件的气道反应性模式测定小鼠雾化激发前后Penh值的变化来评价小鼠的气道反应性；

所述的嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠模型的建立和检测方法在步骤(2)之后、步骤(3)之前还包括咳嗽敏感性检测的步骤，具体为：

使用辣椒素激发液雾化激发小鼠咳嗽，实时监听小鼠咳嗽声音，通过声音分析软件记录声波，并通过Finepointe软件将舱内气流变化转化为呼吸波形进行记录并自动实时分析、计数，以检测小鼠的咳嗽敏感性；

步骤(1)中所述的嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠通过激素治疗后症状缓解；

所述的激素为地塞米松；

步骤(1)中所述的小鼠为雌性Balb/c小鼠，其年龄为7～8周龄，体重为18～20g，动物级别为SPF级；

步骤(1)中所述的气道反应性的检测为在咳嗽敏感性检测6小时后进行。

2.根据权利要求1中所述的嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠模型的建立和检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述的激发通过如下步骤实现：将小鼠麻醉后用含有10μg OVA的OVA溶液滴鼻激发；

所述的OVA溶液通过如下方法配制得到：将OVA粉末溶解到生理盐水中，得到OVA溶液；其中，OVA粉末的用量按每毫克OVA粉末配比5ml生理盐水计算。

3.根据权利要求1中所述的嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠模型的建立和检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述的致敏通过如下步骤实现：小鼠在第0天、第7天和第14天腹腔注射含有10μg OVA和1.3mg佐剂氢氧化铝的OVA溶液使小鼠致敏；

所述的OVA溶液通过如下方法配制得到：

(I)将OVA粉末溶解到生理盐水中，得到混合液A；其中，混合液A的浓度为2mg/ml；

(II)将混合液A与生理盐水按体积比1:19混合均匀，得到混合液B；

(III)将混合液B与佐剂氢氧化铝凝胶按体积比1：1混合均匀，得到混合液C；其中，佐剂氢氧化铝凝胶的浓度为13mg/ml；

(IV)将混合液C在4℃条件下放置1h，得到OVA溶液。

4.根据权利要求1中所述的嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠模型的建立和检测方法，其特征在于：

步骤(3)所述的使用乙酰甲胆碱雾化激发为依次使用浓度为3.125mg/ml、6.25mg/ml、12.5mg/ml、25mg/ml和50mg/ml的乙酰甲胆碱雾化激发，每次雾化1min，记录3min，乙酰甲胆碱经雾化后进入体描舱内，由小鼠通过自主呼吸吸入。

5.根据权利要求1中所述的嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠模型的建立和检测方法，其特征在于：

所述的辣椒素激发液的浓度为100μmol/L，雾化剂量为1.0ml/3min；

所述的声音分析软件为cooledit软件。

6.根据权利要求1中所述的嗜酸粒细胞性支气管炎小鼠模型的建立和检测方法，其特征在于：

所述的辣椒素激发液由以下步骤配制而成：先将30.5mg的辣椒素，1ml的吐温80，1ml的无水乙醇和8ml的生理盐水混合均匀，得到原液；再取出0.5ml的原液与49.5ml的生理盐水混合均匀，得到辣椒素激发液。