[发明专利]用于PCR阵列的多基因绝对定量方法在审
| 申请号： | 201811207651.2 | 申请日： | 2018-10-17 |
| 公开（公告）号： | CN109750090A | 公开（公告）日： | 2019-05-14 |
| 发明（设计）人： | 李铭洲;郑尤琇 | 申请（专利权）人： | 奎克生技光电股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京同立钧成知识产权代理有限公司 11205 | 代理人： | 吴志红;臧建明 |
| 地址： | 中国台湾新竹科学工业园区*** | 国省代码： | 中国台湾;71 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引子 标准品 核酸样品 核酸 标靶 多基因 反应孔 正向 序列特异性 扩增效率 拷贝 载具 测试 配置 | ||
1.一种用于PCR阵列的多基因绝对定量方法，包括：
在测试载具的多个反应孔中分别配置用以扩增多个标准品DNA或欲测定的核酸标靶的引子；以及
将已知拷贝数目但数目不同的多个所述标准品DNA及核酸样品混合加入多个所述反应孔中，所述核酸样品含有至少一种所述核酸标靶，对多个所述标准品DNA及所述核酸样品进行qPCR，
其中分别针对每一所述标准品DNA设计具有序列特异性的正向引子及反向引子的组合，在所述正向引子及所述反向引子所对应的区域之间具有相同的DNA模版序列，用以扩增多个所述标准品DNA以及欲测定的所述核酸标靶的引子具有相似的扩增效率。
2.根据权利要求1所述的用于PCR阵列的多基因绝对定量方法，还包括以log(拷贝数目)为横轴，Cq值为纵轴，依据多个所述标准品DNA的不同拷贝数目以及Cq值制作标准曲线之后，将所述核酸标靶的Cq值代入所述标准曲线，以得到所述核酸标靶的拷贝数目。
3.根据权利要求1所述的用于PCR阵列的多基因绝对定量方法，其中所述扩增效率包括Tm值。
4.根据权利要求1所述的用于PCR阵列的多基因绝对定量方法，其中针对所述测试载具的多个所述反应孔分出多个群组，每一所述群组由多个所述反应孔组成，在每一所述群组的多个所述反应孔中配置同一种用以扩增所述标准品DNA或所述核酸标靶的引子。
5.根据权利要求4所述的用于PCR阵列的多基因绝对定量方法，其中每一所述群组的所述反应孔组成为3×3。
6.根据权利要求4所述的用于PCR阵列的多基因绝对定量方法，其中每一所述群组用以针对多个所述标准品DNA中的其中一者或单一种类的所述核酸标靶进行qPCR。
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