[发明专利]一株地衣芽孢杆菌菌株及其在抑制细菌性病原菌中的应用有效

专利信息
申请号: 201811209863.4 申请日: 2018-10-17
公开(公告)号: CN109182215B 公开(公告)日: 2021-09-24
发明(设计)人: 吴红;李昌珠;肖志红;张爱华;李培旺;曾超珍;黎继烈;任泽文 申请(专利权)人: 湖南省林业科学院;中南林业科技大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;A61K35/742;A61P31/04;A23K10/18;A01N63/22;A01P1/00;C12R1/10
代理公司: 长沙朕扬知识产权代理事务所(普通合伙) 43213 代理人: 魏龙霞
地址: 410000 *** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 地衣 芽孢 杆菌 菌株 及其 抑制 细菌性 病原菌 中的 应用
【权利要求书】:

1.一株地衣芽孢杆菌( Bacillus licheniformis ) 菌株,其特征在于,该地衣芽孢杆菌菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心,其命名为地衣芽孢杆菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1),其在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为GDMCC No:60393,保藏时间为2018年6月25日。

2.一种根据权利要求1所述的地衣芽孢杆菌菌株在抑制细菌性病原菌中的应用,其特征在于,所述细菌性病原菌包括肠沙门氏菌肠亚种(Salmonella enterica subsp. Enterica)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)中的一种或多种。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述应用的方法具体包括如下步骤:挑取活化后的地衣芽孢杆菌MR-1的单菌落菌丝,于液体NA培养基中进行扩繁培养,将得到的种子液接种到液体发酵培养基中进行发酵培养,得到地衣芽孢杆菌MR-1发酵菌液,将所述地衣芽孢杆菌MR-1发酵菌液与细菌性病原菌进行接触,即实现对细菌性病原菌的抑制。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述地衣芽孢杆菌MR-1的活化方法包括以下步骤:在无菌环境下,取一株产蛋白酶短小的地衣芽孢杆菌MR-1挑取一环在固体NA培养基上划线,在28-35℃条件下倒置培养18-24h后,得到活化的地衣芽孢杆菌MR-1。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述固体NA培养基的组分包括牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂和去离子水,所述牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂和去离子水的质量比为(3-4):(8.9-10.2):(3.5-5):(19-21):1000,所述固体NA培养基的pH为 6.8-7.2。

6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述液体NA培养基的组分包括牛肉膏、蛋白胨、氯化钠和去离子水,所述牛肉膏、蛋白胨、氯化钠和去离子水的质量比为(3-4):(8.9-10.2):(3.5-5):1000,所述液体NA培养基的pH为 6.8-7.2。

7.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述液体发酵培养基的组分包括干酪素、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠和去离子水,所述干酪素、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠和去离子水的质量比为(3-4):(2.5-3.5):(8.9-10.2):(3.5-5):1000,所述液体发酵培养基的pH值为7.2-7.4。

8.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述扩繁培养的温度为28-35℃,扩繁培养的时间为18-24h,扩繁培养时摇床震荡的转速为160-180r/min。

9.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述发酵培养的接种量为5-15%,发酵培养的温度为25-30℃,发酵培养的时间为2-4d,发酵培养时摇床震荡的转速为160-180r/min,液体发酵培养基在接种前先经过20-30min的121℃灭菌处理。

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