[发明专利]一株地衣芽孢杆菌菌株及其在抑制细菌性病原菌中的应用

说明书

本发明公开了一株地衣芽孢杆菌菌株，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，命名为地衣芽孢杆菌MR‑1(Bacillus licheniformis MR‑1)，其在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为GDMCC No：60393，保藏时间为2018年6月25日。该菌株具有一定的益生性，对于细菌性病原菌有一定的抑制性，可用于抑制细菌性病原菌。本发明还公开一种地衣芽孢杆菌MR‑1在抑制细菌性病原菌中的应用，有力的解决了使用抗生素带来的细菌抗药性及药物残留对人体健康的损害问题，甚至可以制作成益生菌饲料添加剂，有助于推进油茶枯饼在饲料中的应用，增加资源利用率。

技术领域

本发明属于微生物工程技术领域，尤其涉及一株地衣芽孢杆菌菌株及其在抑制细菌性病原菌中的应用。

背景技术

地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)是芽孢杆菌中较具应用潜力的菌种之一。近年来，国内外对于地衣芽孢杆菌各方面应用的报道日益增多。在医药、饲料加工、农药等行业，取得了较好的研究成果。地衣芽孢杆菌具有调节动物微生态平衡，促进肠道有益菌生长，降低病原菌的数量，增加动物机体的抗病力，提高机体的免疫功能的作用。

目前，使用抗生素带来的细菌抗药性及药物残留对人体健康的损害问题日益严重，急需要寻找一种无毒，无副作用，并对如肠沙门氏菌肠亚种(Salmonella entericasubsp.Enterica)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)等细菌性病原菌具有抑制作用的天然生长促进剂，来代替抗生素以减少抗生素的使用量。这对医药、饲料加工、农药领域来说具有十分重要的现实意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一株地衣芽孢杆菌菌株及其在抑制细菌性病原菌中的应用。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为提供一株地衣芽孢杆菌菌株，该地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心，其命名为地衣芽孢杆菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1)，其在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为GDMCC No：60393，保藏时间为2018年6月25日，保藏单位的地址位于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所。

上述的地衣芽孢杆菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1)是从新鲜幼猪猪粪中分离纯化获得，在NA平板上，30℃培养一段时间后，菌落形态呈白色，扁平状，透明性差。显微镜观察呈现细胞呈杆状，革兰氏染色为阳性。

上述的地衣芽孢杆菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1)的DNA基因序列，见SEQ ID NO.1所示。

上述的地衣芽孢杆菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1)，其16SrDNA序列在Genbank数据库中用BLAST进行同源性分析，得到相似性较高的序列，运用MEGA6.06软件构建系统发育树；测得该菌与地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)(KY433888.1)相似性达到98％，证明该菌株属于地衣芽孢杆菌属，结合形态学鉴定为地衣芽孢杆菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1)。

基于一个总的技术构思，本发明还相应提供一种上述的地衣芽孢杆菌菌株在抑制细菌性病原菌中的应用。

上述的应用，优选的，所述应用的方法具体包括如下步骤：挑取活化后的地衣芽孢杆菌MR-1的单菌落菌丝，于液体NA培养基中进行扩繁培养，将得到的种子液接种到液体发酵培养基中进行发酵培养，得到地衣芽孢杆菌MR-1发酵菌液，将所述地衣芽孢杆菌MR-1发酵菌液与细菌性病原菌进行接触，即实现对细菌性病原菌的抑制。