[发明专利]一类具有保健作用的细脚棒束孢虫草复合种菌种的获得方法在审
申请号: | 201811210450.8 | 申请日: | 2018-10-17 |
公开(公告)号: | CN109266557A | 公开(公告)日: | 2019-01-25 |
发明(设计)人: | 李传华;张劲松;陈明杰;余昌霞;奚莉萍;汪虹 | 申请(专利权)人: | 上海市农业科学院 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N1/02;C12R1/645 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达;魏峯 |
地址: | 201106 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 棒束 细脚 虫草 菌种 复合种 保健作用 活力强 单孢 保健产品 虫草菌丝 顶端部位 培养基 单倍体 可分离 子座 发酵 配制 复合 栽培 应用 开发 | ||
1.一类具有保健作用的细脚棒束孢虫草复合种菌种的获得方法,包括:
收集生长于空气温度为15-28℃、湿度为80-90%、长在峭壁上的野生细脚棒束孢虫草复合种,从野生细脚棒束孢虫草复合种子座顶端部位取子囊,置于预先配制的培养基中,在18-20℃暗光下培养7-10d,获得含有细脚棒束孢虫草复合种菌丝的单倍体菌种。
2.根据权利要求1所述的获得方法,其特征在于:所述培养基的配方为土豆200g、葡萄糖20g、麦芽汁5mL、蛋白胨8g、牛肉膏6g、酵母膏6g、硫酸镁0.25g、磷酸氢二钾0.5g、琼脂20g、维生素B1100mg、蒸馏水1000mL,pH6-6.5。
3.根据权利要求2所述的获得方法,其特征在于:所述培养基的配制步骤如下:土豆煮水过滤,依次加入除维生素B1之外的其它原料,待完全溶解后定容至1000mL,分装三角瓶后灭菌;灭菌后待培养基冷却至低于45℃时,在超净工作台中加入融化好的维生素B1,然后用精密试纸调节溶液pH为6-6.5,并在超净工作台中分装试管备用。
4.根据权利要求1所述的获得方法,其特征在于:对初步获得的细脚棒束孢虫草复合种菌丝进行菌落观察,未发现有其他形态的菌落,然后在40倍物镜下镜检,未发现有锁状联合等形态菌丝,即可判定所获得的细脚棒束孢虫草复合种为单倍体菌种;若发现菌落具有不同形态特征,则挑取需要的菌丝于含有青霉素的培养基中,待7-10d后菌丝生长后再接入普通培养基中培养7-10d即获得纯化的细脚棒束孢虫草复合种菌种。
5.根据权利要求4所述的获得方法,其特征在于:所述含有青霉素的培养基的配制步骤如下:土豆200g煮水、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL,灭菌后冷却至50℃在超净工作台中加入10mg青霉素。
6.根据权利要求4所述的获得方法,其特征在于:所述普通培养基的配方为:葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL。
7.根据权利要求1所述的获得方法,其特征在于:将获得的单倍体菌种接种于大米或小麦进行栽培生产、固体发酵或液体发酵。
8.根据权利要求7所述的获得方法,其特征在于:所述固体发酵或液体发酵具体为:将获得的单倍体菌种接种于事先灭菌好的培养基中进行发酵培养,获得细脚棒束孢虫草发酵物;所述栽培生产具体为:将获得的单倍体菌种接种于事先灭菌好的大米或小麦培养基中,经40-50d后获得细脚棒束孢虫草子实体。
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