[发明专利]一种提高酵母菌耐盐能力的共培养方法

权利要求书

1.一种提高酵母菌耐盐能力的方法，包含以下步骤：

（1）乳酸菌和酵母菌种子液的制备；

（2）乳酸菌的前培养；

（3）乳酸菌和酵母菌的共培养；

所述乳酸菌的前培养包含以下步骤：

（1）乳酸菌前培养培养基：10 g/L蛋白胨，8 g/L牛肉膏，4 g/L酵母粉，20 g/L葡萄糖，0.1% 山梨醇单油酸酯，2 g/L磷酸氢二钾，5 g/L三水乙酸钠，2 g/L柠檬酸三铵，0.2 g/L七水合硫酸镁，0.2 g/L 四水合硫酸锰，6 %NaCl，pH6.2；

（2）将收集到的乳酸菌菌体重悬到4 mL无菌水中，取其中1 mL到30 mL的前培养培养基中，30℃静置培养4 h；

所述乳酸菌和酵母菌的共培养：所述乳酸菌在前培养培养基中培养4 h后，再将收集的酵母菌菌体重悬到4 mL无菌水中，取其中0.5 mL接种至所述乳酸菌的前培养体系中，30℃静置培养4 h；

耐盐能力的测定：取共培养结束后的菌悬液进行梯度稀释，吸取一定量合适稀释倍数下的菌悬液，接种到含有0 .01%氯霉素和12 %NaCl的酵母菌固体选择培养基上，30℃静置培养；

所述乳酸菌为嗜盐四联球菌(Tetragenococcus halophilus) CGMCC No. 3792，所述酵母菌为鲁氏酵母（Zygosaccharomyces rouxii）CGMCC No. 3791。

2.根据权利要求1所述提高酵母菌耐盐能力的方法，其特征在于：所述乳酸菌和酵母菌种子液的制备，包含以下步骤：

（1）乳酸菌培养基为：10 g/L蛋白胨，8 g/L牛肉膏，4 g/L酵母粉，20 g/L葡萄糖，0.1%山梨醇单油酸酯，2 g/L磷酸氢二钾，5 g/L三水乙酸钠，2 g/L柠檬酸三铵，0.2 g/L七水合硫酸镁，0.2 g/L 四水合硫酸锰，6 %NaCl，pH6.2；酵母菌培养基为：10 g/L酵母粉，20 g/L蛋白胨，20 g/L葡萄糖，6 %NaCl，pH 6.0；

（2）分别取-80℃保藏的1 mL乳酸菌和酵母菌甘油管储存液接种于5 mL乳酸菌培养基和酵母菌培养基中，30℃静置培养24 h，再转接到100 mL乳酸菌培养基和酵母菌培养基中，30℃静置培养24 h；

（3）将上述培养的种子液于10000 rpm、4℃条件下离心5 min收集菌体。