[发明专利]一种同时快速检测UGT1A1*6型与UGT1A1*28型基因多态性的试剂盒及方法

权利要求书

1.一种同时快速检测UGT1A1*6型与UGT1A1*28型基因多态性的试剂盒，其特征在于，用于检测与肿瘤化疗药物伊立替康不良反应相关基因UGT1A1*6型与*UGT1A1*28型基因多态性，包括样本处理试剂、基因检测试剂、阳性对照品和阴性对照品。

2.如权利要求1所述的一种同时快速检测UGT1A1*6型与UGT1A1*28型基因多态性的试剂盒，其特征在于，基因检测试剂采用PCR8联管单人份预混分装，包括：

检测UGT1A1*6型引物对：SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.2；

检测UGT1A1*6(211G＞A)型特异性探针SEQ ID NO.3-SEQ ID NO.4；

检测UGT1A1*28(6TA＞7TA)型引物对：SEQ ID NO.5-SEQ ID NO.6；

检测UGT1A1*28型特异性探针SEQ ID NO.7-SEQ ID NO.8；

探针核酸序列5’采用FAM、JOE、VIC、NED和ROX中的一种修饰，探针核酸序列3’采用MGB-NFQ基团修饰。

3.如权利要求2所述的一种同时快速检测UGT1A1*6型与UGT1A1*28型基因多态性的试剂盒，其特征在于，引物探针设计如下：

SEQ ID NO.1为UGT1A1 211G＞A上游引物：

5’-AGCTCCACCTTCTTATCTCTG-3’；

SEQ ID NO.2为UGT1A1 211G＞A下游引物：

5’-TTGTGCAGTAAGTGGGAACA-3’；

SEQ ID NO.3为UGT1A1 211G荧光探针：

5’-荧光基团-TAAATGCTCGTCTCT-MGB-NFQ-3’；

SEQ ID NO.4为UGT1A1 211A荧光探针：

5’-荧光基团-TAAATGCTCTGTCTCT-MGB-NFQ-3’；

SEQ ID NO.5为UGT1A1 6TA＞7TA上游引物：

5’-CATTAACTTGGTGTATCGATTGGT-3’；

SEQ ID NO.6为UGT1A1 6TA＞7TA下游引物：

5’-CAGCATGGGACACCACTG-3’；

SEQ ID NO.7为UGT1A1 6TA荧光探针：

5’-荧光基团-TGCCATATATATATATATAGTAG-MGB-NFQ-3’；

SEQ ID NO.8为UGT1A1 7TA荧光探针：

5’-荧光基团-GCCATATATATATATATATAAGTA-MGB-NFQ-3’。

4.如权利要求1所述的一种同时快速检测UGT1A1*6型与UGT1A1*28型基因多态性的试剂盒，其特征在于，基因检测试剂还包括：还包括用于内部质控的内参引物对SEQ IDNO.11-SEQ ID NO.12和内参探针SEQ ID NO.13，探针采用TaqMan探针，5’修饰CY5荧光基团，3’采用BHQ淬灭基团修饰。

5.如权利要求4所述的一种同时快速检测UGT1A1*6型与UGT1A1*28型基因多态性的试剂盒，其特征在于，引物探针设计如下：

SEQ ID NO.11为内参上游引物：

5’-CCTTCCTGCCACCGCTGAT-3’；

SEQ ID NO.12为内参下游引物：

5’-TGCCTTCGCAACCATTCCCTTA-3’；

SEQ ID NO.13为内参探针：

5’-荧光基团-CGCTATGCTCCGCGCGCATCGTCTGCTC-BHQ-3’。

6.如权利要求1所述的一种同时快速检测UGT1A1*6型与UGT1A1*28型基因多态性的试剂盒，其特征在于，基因检测试剂还包括：具有抗PCR酶抑制剂的PCR预混液-TaqPathProAmp Master Mix，预混液包含经修饰后的Hotstart-Taq聚合酶、UNG酶、ROX荧光校准染料、dNTP、MgCl2、PCR buffer。