[发明专利]一种快速高效检测药源性皮肤不良反应相关基因多态性的试剂盒及方法

说明书

本发明公开了一种快速高效检测药源性皮肤不良反应相关基因多态性的试剂盒及方法，属于基因检测技术领域，相关基因多态性包括HLA‑B*1502和HLA‑B*5801基因多态性，试剂盒包括用于用于人全血样本处理的样本处理试剂、采用PCR8联管单人份预混分装的基因检测试剂、阳性对照品和阴性对照品，阳性对照品为基因质粒DNA和内参质粒DNA，阴性对照品为不含靶基因和内参基因的超纯水。本发明为提升检测的特异性和灵敏性，采用根据靶基因序列设计的特异性扩增引物对和MGB‑NFQ荧光探针，进行特异扩增和实时检测分析，使检测能从HLA‑B多达几千种等位基因多态性中准确、特异、灵敏地检出目的基因变异。

技术领域

本发明涉及一种基因多态性的试剂盒及方法，特别是涉及一种快速高效检测药源性皮肤不良反应相关基因多态性的试剂盒及方法，属于基因检测技术领域。

背景技术

调查研究表明，卡马西平、苯妥英等药物用于HLA-B*1502等位基因阳性亚裔患者治疗出现史蒂文斯一约翰逊综合征sJs和中毒性表皮坏死松解症TEN的严重皮肤反应的初步数据，HLA-B*1502是一种人类白细胞抗原HLA等位基因，几乎只存在于亚洲人种之中，包括中国汉族人、菲律宾人、马来西亚人、南亚印度人和泰国人。

在中国、泰国、马来西亚、印度尼西亚、菲律宾和中国台湾地区估计有10％-15％甚至更多的患者携带HLA-B*1502等位基因，包括印度人在内的南亚人携带该基因的比率中等，平均为2％-4％，但在一些人群中比率较高，日本人和韩国人携带此基因的比率较低，不到l％。

目前，卡马西平、苯妥英等抗癫痫的药品说明书建议，可能携带 HLA-B*1502等位基因的患者在接受卡马西平、苯妥英等抗癫痫卡马西平治疗之前应进行HLA-B*1502等位基因筛查，筛查结果阳性的患者不宜使用卡马西平、苯妥英等抗癫痫，除非其效益明显大于风险。

HLA-B*58：01等位基因位于人类第6号染色体，是人类白细胞抗原的基因型，HLA-B*5801等位基因与别嘌呤醇引发的SJS或TEN 的强相关性首先由台湾学者在汉族人群中发现，并被泰国、新加坡、香港和中国多个研究小组在汉族人群中证实，在其他人种，日本人和韩国人也被证明呈现很强的相关性，欧洲病人中SJS与HLA-B*5801 呈现相对较弱的相关性。

2012年美国风湿病学会更新了痛风管理指南，其中建议使用别嘌呤醇前，对严重过敏反应的高危人群，建议进行HLA-B*5801等位基因检测，该高危人群包括韩国裔、中国裔汉族和泰国裔，因此， HLA-B*5801与别嘌呤醇引发的SJS或TEN的强相关性有种族差异性，汉族人中HLA-B*5801等位基因频率为6-15％，具有地域差异。

发明内容

本发明的主要目的是为了提供一种快速高效检测药源性皮肤不良反应相关基因多态性的试剂盒及方法，解决现有技术中检测 HLA-B*1502和HLA-B*5801基因多态性时对样本处理要求高、检测周期长、操作复杂、成本高和特异性不强等问题。

本发明的目的可以通过采用如下技术方案达到：

一种快速高效检测药源性皮肤不良反应相关基因多态性的试剂盒，相关基因多态性包括HLA-B*1502和HLA-B*5801基因多态性，试剂盒包括样本处理试剂、基因检测试剂、阳性对照品和阴性对照品。

进一步的，基因检测试剂包括：

检测HLA-B*1502引物对SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2；

检测HLA-B*1502特异性探针SEQ ID NO.3；

检测HLA-B*5801引物对SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5；

检测HLA-B*5801特异性探针SEQ ID NO.6；