[发明专利]一种鼠李糖乳杆菌噬菌体的快速定量检测方法

权利要求书

1.一种鼠李糖乳杆菌噬菌体的快速定量检测方法，包括如下步骤：

1）鼠李糖乳杆菌菌毛亚基SpaA特异性多克隆抗体与纳米磁珠偶联，得到SpaA抗体偶联的纳米磁珠；

2）鼠李糖乳杆菌特异性吸附样品中的噬菌体颗粒，得到鼠李糖乳杆菌-噬菌体复合物；

3）步骤1）制得的SpaA抗体偶联的纳米磁珠捕获与分离步骤2）制得的鼠李糖乳杆菌-噬菌体复合物；

4）免疫磁珠电化学传感器定量检测样品中的噬菌体含量。

2.根据权利要求1所述的一种鼠李糖乳杆菌噬菌体的快速定量检测方法，其特征在于，步骤1）中，选择SpaA特异性多克隆抗体与纳米磁珠偶联，作为鼠李糖乳杆菌-噬菌体复合物的免疫磁珠。

3.根据权利要求1所述的一种鼠李糖乳杆菌噬菌体的快速定量检测方法，其特征在于，步骤2）中，以鼠李糖乳杆菌活细胞特异性吸附样品中的噬菌体颗粒，通过离心和PBS洗涤，去除非特异性吸附颗粒，以得到鼠李糖乳杆菌-噬菌体复合物。

4.根据权利要求1所述的一种鼠李糖乳杆菌噬菌体的快速定量检测方法，其特征在于，步骤3）中，以SpaA抗体偶联的纳米磁珠特异性捕获鼠李糖乳杆菌-噬菌体复合物，再通过磁场分离、PBS洗涤，获得SpaA抗体偶联的纳米磁珠-鼠李糖乳杆菌-噬菌体复合物。

5.根据权利要求1所述的一种鼠李糖乳杆菌噬菌体的快速定量检测方法，其特征在于，步骤4）中，以磁性玻碳电极作为工作电极，铅丝与饱和甘汞电极分别用作对电极和参比电极，在铁氰化钾溶液中测定样品和对照中的电阻值差异，根据标准曲线对样品中噬菌体进行定量。

6.一种鼠李糖乳杆菌噬菌体的快速定量检测方法，其特征在于，具体步骤为：通过鼠李糖乳杆菌菌毛亚基SpaA特异性多克隆抗体与纳米磁珠偶联形成特异性免疫磁珠；利用鼠李糖乳杆菌活细胞对样品中的噬菌体颗粒进行特异性吸附，得到鼠李糖乳杆菌-噬菌体复合物；应用免疫磁珠捕获鼠李糖乳杆菌-噬菌体复合物、通过磁场分离、PBS洗涤后，再用磁性玻碳电极测定免疫磁珠-鼠李糖乳杆菌-噬菌体复合物的电阻值，实现对样品中噬菌体的快速定量检测。