[发明专利]多潜能干细胞诱导获得脊髓GABA能中间神经元的方法

说明书

本发明涉及多潜能干细胞诱导获得脊髓GABA能中间神经元的方法，该方法采用单层细胞诱导方法，利用多潜能干细胞进行诱导分化，逐步形成神经上皮细胞、脊髓神经前体细胞、脊髓GABA能中间神经元。本发明所述方法快速高效，可以得到临床级别的脊髓GABA能中间神经元。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体指多潜能干细胞诱导获得脊髓GABA能中间神经元的方法。

背景技术

脊髓损伤是常见的创伤性疾病，引起一系列的运动和心理问题，常见于30岁以下的人群。据统计，全球每年新增250,000至500,000例脊髓损伤患者，我国目前还未有全国范围内的统计，但从各地方性的统计来看，我国的脊髓损伤发病率远高于欧美国家。据美国2013年统计发现，脊髓损伤影响近100万人的生活质量，且每年医疗花费近400亿(Armour,B.S.,Courtney-Long,E.A.,Fox,M.H.,Fredine,H.,and Cahill,A.(2016).Prevalenceand causes of paralysis-United States,2013.Am.J.Public Health 106,1855–1857)。其中将近40％～50％的患者在1年内继发出现神经病理性疼痛，并在后期转化为慢性疼痛，影响患者的恢复(Jay M Margolis,Paul Juneau,Alesia Sadosky,Joseph C Cappelleri,Thomas N Bryce,Edward C Nieshoff.Health care utilization and expendituresamong Medicaid beneficiaries with neuropathic pain following spinal cordinjury.Journal of Pain Research.2014:7 379–387)。

癌痛是恶性肿瘤患者最常见且最痛苦的症状之一。约70％～87％的患者在癌瘤发展过程中有不同程度的疼痛,而肝癌、胰腺癌、骨肉瘤患者更是在疾病早期就有疼痛发生。仅中国每年就有100多万患者遭受癌性疼痛的折磨。中晚期患者以疼痛为主诉者高达60％～90％,严重降低了患者的生存质量。由于疼痛的加剧和强烈刺激直接影响患者的食欲、睡眠、心理状况和治疗效果，恶性肿瘤患者常常会失去治疗信心和生存欲望(Zhang J.Analgesia mechanism and clinical application of acupuncture.Beijing:People's Medical Publishing House.2007:522.Chinese.L i Q S,Qian H.Cancer complicationsand its management.In:Tang Z Y.Modern oncology.Shanghai:Shanghai MedicalUniversity Press.2000:556.Chinese)。模拟中枢神经损伤的经典模型如脊髓损伤以及癌痛模型均在不同程度上存在脊髓水平GABA能神经元的缺失和功能障碍，从而引起痛觉传导通路的“脱抑制”现象，最终诱发痛觉过敏以及痛觉超敏等异常表现。

目前临床上对于疼痛的治疗主要有药物治疗和物理因子治疗，但药物治疗的全身副作用明显，而物理因子治疗的缓解期短，都达不到理想的治疗效果，需要寻求新的治疗方法。近年来，国内外学者纷纷聚焦于干细胞的新型治疗，取得了重大进展，但依然存在许多问题，比如，移植入体内的细胞不能精确地与宿主细胞形成突触连接，影响细胞在体内发挥作用。目前国内外干细胞治疗疾病引起的疼痛的研究中，并没有移入有针对性类型的细胞(Young S.Gwak*,Claire E.Hulsebosch；GABA and central neuropathic painfollowing spinal cord injury；Neuropharmacology 60(2011)799e808)。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提出了利用多潜能干细胞定向分化为高纯度的脊髓GABA能中间神经元，用于治疗各种疾病引发的疼痛。