[发明专利]一种PDMS微控板处理方法及其应用在审
| 申请号： | 201811248856.5 | 申请日： | 2018-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN109576263A | 公开（公告）日： | 2019-04-05 |
| 发明（设计）人： | 吴双;方南;周璟 | 申请（专利权）人： | 新格元（南京）生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 刘丰 |
| 地址： | 210043 江苏省南京市江北新*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 反转录 控板 捕获 细胞 细胞裂解液 表面吸附 生物实验 细胞裂解 细胞悬液 相容性 应用 测试 | ||
1.一种PDMS微控板处理方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1:PDMS表面处理：吸取PBST溶液，加于PDMS表面，处理时间为10-15min；
S2:加入细胞：加入细胞悬液，静置处理后用PBS洗涤将多余留在表面的细胞冲走；
S3:捕获mRNA：加入细胞裂解液，使细胞裂解，获得mRNA；
S4:反转录及PCR扩增；将捕获到的mRNA进行反转录，获得cDNA；并将cDNA进行PCR扩增，得到PCR产物；
S5:纯化DNA。
2.根据权利要求1所述的一种PDMS微控板处理方法，其特征在于，所述的S1步骤中PBST溶液为：PBST溶液为PBS缓冲液与吐温混合液，所述的吐温浓度为0.01％-0.1％。
3.根据权利要求1所述的一种PDMS微控板处理方法，其特征在于，所述的S1步骤中PBST溶液为：PBST溶液为PBS缓冲液与吐温20混合液，所述的吐温20浓度为0.02％-0.1％。
4.根据权利要求3所述的一种PDMS微控板处理方法，其特征在于，所述的S1步骤中PBST溶液为：PBST溶液的中吐温-20浓度为0.02％，所述的处理时间为15min。
5.根据权利要求4所述的一种PDMS微控板处理方法，其特征在于，所述S1步骤中的0.02％PBST溶液制备方法为：用无核酸酶水配制20％Tween-20母液，然后按照PBS：Tween-20母液＝1000:1的比例配制0.02％PBST，充分涡旋混匀。
6.根据权利要求4所述的一种PDMS微控板处理方法，其特征在于，所述S1步骤中的0.02％PBST溶液制备方法为：按照PBS：Tween-20＝99.98:0.02的比例配制0.02％PBST，充分涡旋混匀。
7.根据权利要求1所述的一种PDMS微控板处理方法，其特征在于，还包括DNA质检。
8.根据权利要求2所述的一种PDMS微控板处理方法，其特征在于，包括S5步骤中DNA纯化方法为磁选纯化。
9.根据权利要求1-8所述的任一种PDMS微控板处理方法，其特征在于，用于哺乳动物细胞DNA提取。
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